[發明專利]多環芳烴降解微生物菌劑

無效

• 申請號: 201010596211.8
• 申請日: 2010-12-10
• 公開（公告）號: CN102533578A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 宮小燕;陸雅海
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/32;C02F101/32
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王加嶺;張慶敏

技術領域

本發明屬于微生物菌劑領域，具體地，涉及一種含有淺黃分枝桿菌和微嗜酸寡營養單胞菌的多環芳烴降解微生物菌劑。

背景技術

多環芳烴(PAHs)是指兩個或兩個以上苯環連在一起構成的烴類化合物，其中許多種類具有致癌、致畸、致突變作用，其毒性和致癌性隨著苯環數目的增加而增加。環境中PAHs主要來源于人類活動，如石油冶煉、運輸業、煤氣制造等。由于石油及石油產品的大量使用，環境中多環芳烴有不斷增多的趨勢，而且分布廣泛，在大氣、水體、土壤、沉積物和食品中都可以檢測到多種PAHs的存在。

環境中的多環芳烴主要是在微生物的降解作用下去除，隨著多環芳烴環數的增加，其結構更加穩定，疏水性增強，從而使生物降解性降低，尤其是四環以上的PAH。因此，篩選出高效降解菌是多環芳烴污染土壤生物修復技術的一個關鍵。

目前國內外常用于多環芳烴降解是單一的純化降解菌，是以PAH為唯一碳源從環境中分離純化后得到的。由于在純化過程中，失去了自然條件下與共協同共存菌株的作用，對環境適應能力和分解能力大大降低。

綜上所述，利用多環芳烴降解微生物進行污染土壤的生物修復具有巨大的應用潛力。分枝桿菌是一個重要的具有四環及以上環PAHs較強降解能力的微生物類群，分枝桿菌降解PAHs的菌株篩選已有報道，但是分支桿菌的微生物菌劑及其對多環芳烴污染土壤的修復效果未見報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種多環芳烴降解微生物菌劑。

為了實現本發明的目的，本發明的多環芳烴降解微生物菌劑，其有效成分包括：淺黃分枝桿菌(Mycobacterium?gilvum)P6和微嗜酸寡營養單胞菌(Stenotrophomonas?acidaminiphila)P56。

其中，本發明的淺黃分枝桿菌P6菌株，其分類命名為Mycobacterium?gilvum，現已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區大屯路中科院微生物研究所，保藏編號CGMCC4380，保藏日期2010年11月30日。

本發明的微嗜酸寡營養單胞菌P56菌株，其分類命名為Stenotrophomonas?acidaminiphila，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區大屯路中科院微生物研究所，保藏編號CGMCC4381，保藏日期2010年11月30日。

本發明的多環芳烴降解微生物菌劑，其包括如下體積比的組分：淺黃分枝桿菌P6：微嗜酸寡營養單胞菌P56＝1-2∶1。

所述菌劑同時可加入適量的無機鹽成分，所述無機鹽包括Na₂HPO₄.12H₂O、KH₂PO₄、NH₄NO₃、MgSO₄.7H₂O、FeCl₃、CaCl₂、MnSO₄.2H₂O、H₃BO₃、CoCl₂.6H₂O、CuCl₂.2H₂O、NiCl₂.6H₂O、Na₂MoO₄.2H₂O和ZnCl₂。

本發明的多環芳烴降解微生物菌劑在降解有機芳香化合物中的應用，其中所述的有機芳香化合物為多環芳烴，其包括芘、菲、熒蒽、芴、萘、蒽、苊。

本發明的淺黃分枝桿菌P6和微嗜酸寡營養單胞菌P56菌株分離自燕山石化煉油廠排污口污泥中。

本發明的淺黃分枝桿菌P6的形態學特征為：在Luria-Bertani固體培養中上30℃培養6天，形成肉可見的菌落，菌落為黃色，圓形，中間突起，光滑，邊緣整齊，粘稠。革蘭氏染色陽性，不產芽孢，短桿狀。

本發明的淺黃分枝桿菌P6的生理生化特征為：該菌能以0～2％NaCl生長，接觸酶為陽性，發酵乳糖、木糖、蔗糖、葡萄糖，不利用淀粉。根據16S?rRNA堿基序列分析，與美國標準菌種保藏中心的編號為ATCC-43909的相似率為99％。