[發明專利]抑制植物病毒的人工miRNA及其構建和用途

有效

• 申請號: 201010595919.1
• 申請日: 2010-12-18
• 公開（公告）號: CN102559666A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 孫傳寶;何玉科
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/63;C12N15/82;C12N5/10
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種分離的或人工構建的寡核苷酸，所述的寡核苷酸選自：

(i)SEQ?ID?NO：1-SEQ?ID?NO：4任一所示序列的寡核苷酸；或

(ii)與(i)限定的任一序列互補的寡核苷酸。

2.一種構建物，所述的構建物含有權利要求1所述的寡核苷酸，且其在導入植物細胞、組織或器官后，能夠表達權利要求1所述的寡核苷酸所對應的miRNA。

3.如權利要求2所述的構建物，其特征在于，所述構建物中含有：

選自SEQ?ID?NO：1或SEQ?ID?NO：3的序列；和

選自SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：4的序列。

4.如權利要求2所述的構建物，其特征在于，所述的構建物是表達載體。

5.如權利要求2所述的構建物，其特征在于，所述的構建物含有至少一組式I所示的結構：

Seq_正向-X-Seq_反向????????????式I；

式I中，

Seq_正向為權利要求1所述的寡核苷酸序列；

Seq_反向為與Seq_正向基本上互補的寡核苷酸序列；

X為位于Seq_正向和Seq_反向之間的間隔序列，并且所述間隔序列與Seq_正向和Seq_反向不互補。

6.如權利要求5所述的構建物，其特征在于，式I所示的結構在轉入植物細胞后，形成式II所示的二級結構：

式II，

式II中，Seq_正向、Seq_反向和X的定義如上述，

||表示在Seq_正向和Seq_反向之間的基本上互補的關系。

7.權利要求1所述的寡核苷酸或權利要求2-6任一項所述的構建物的用途，用于制備抗病毒的試劑；或用于制備提高植物抗病毒能力的試劑。

8.一種提高植物抗病毒能力的方法，其特征在于，所述的方法包括步驟：

(a)提供權利要求2-6所述的任一構建物；

(b)將(a)中所述的構建物導入到植物中。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述的將構建物導入到植物的方法包括：

(1)提供攜帶權利要求2-6所述的任一構建物的農桿菌；

(2)將植物細胞或組織或器官與步驟(1)中的農桿菌接觸，從而使所述的構建物轉入植物。

10.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述的病毒是：蕪菁花葉病毒(Turnip?mosaic?virus.)或黃瓜花葉病毒(Cucumber?mosaic?virus.)。

11.一種miRNA，其是SEQ?ID?NO：37-SEQ?ID?NO：40任一所示核苷酸序列的miRNA。

12.一種植物細胞或組織，其特征在于，它是選自下組：

(a)用權利要求2-6任一所述的構建物轉化或轉染的細胞；或

(b)含有權利要求13所述的miRNA的細胞。