[發(fā)明專利]一種可視薄膜感受器芯片及其制備方法和應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010594802.1
• 申請日: 2010-12-17
• 公開（公告）號: CN102127598A
• 公開（公告）日: 2011-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧興旺;陳浩東;楊洋;唐達芳
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京君尚知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11200
• 代理人: 李稚婷

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及可視薄膜感受器芯片的制備及在快速檢測和鑒定生物體中特異核苷酸序列和單核苷酸多態(tài)性方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，能夠快速、準確地鑒定特異核苷酸非常必要。目前，通過鑒定核苷酸來區(qū)分不同物種甚至不同個體已經(jīng)被運用得非常廣泛。海關(guān)和政府經(jīng)常需要檢測生物體或生物制品中遺傳成分是否符合相應(yīng)的法規(guī)要求。隨著轉(zhuǎn)基因育種的研究和市場化日益增多，生物體或制品中的外源基因序列檢測要求日益升高。為了滿足以上種種需求，需要開發(fā)適用性廣、價格低、特異性好、使用方便的測定方法。

目前已有的鑒定特異核酸序列和多態(tài)性的方法可以分為兩大類：

第一個類別是單一檢測技術(shù)，主要是以PCR為基礎(chǔ)的檢測。PCR是擴增特定核酸序列的常用方法，檢測擴增核酸序列的基本技術(shù)是凝膠電泳，通過凝膠電泳可以粗略地觀察片段的大小及含量(Chiueh，L.C.，Chen，Y.L.and?Shih，D.Y.C.(2002)Study?on?the?detection?method?of?six?varieties?of?genetically?modified?maize?and?processed?foods.J.Food?Drug?Anal.10，25-33；German，M.A.，Kandel-Kfir，M.，Swarzberg，D.，Matsevitz，T.and?Granot，D.(2003)A?rapid?method?for?the?analysis?of?zygosity?in?transgenic?plants.Plant?Sci.164，183-187；Holst-Jensen，A.，Ronning，S.B.，Lovseth，A.and?Berdal，K.G.(2003)PCR?technology?for?screening?and?quantification?of?genetically?modified?organisms(GMOs).Anal.Bioanal.Chem.375，985-993；Miraglia，M.，Berdal，K.G.，Brera，C.et?al.(2004)Detection?and?traceability?of?genetically?modified?organisms?in?the?food?production?chain.Food?Chem.Toxicol.42，1157-1180；Su，W.，Song，S.，Long，M.and?Liu，G.(2003)Multiplex?polymerase?chain?reaction/membrane?hybridisation?assay?for?detection?of?genetically?modified?organisms.J.Biotechnol.105，227-233.)。實時PCR(Real-time?PCR)現(xiàn)在被廣泛地用來對核酸進行定量檢測，在PCR反應(yīng)的過程中，通過監(jiān)測代表擴增結(jié)果的熒光信號的量，來實時跟蹤PCR擴增的結(jié)果。實時PCR的應(yīng)用需要特定的儀器及熒光探針，檢測快速靈敏，但是價格昂貴，并且需要嚴格的質(zhì)量控制，否則容易產(chǎn)生假陽性的信號Baric，S.and?Dalla-Via，J.(2004)Anew?approach?to?apple?proliferation?detection：a?highly?sensitive?real-time?PCR?assay.J.Microbiol.Methods，57，135-145；Hernandez，M.，Esteve，T.，Prat，S.and?Pla，M.(2004)Development?of?real-time?PCR?systems?based?on?SYBR?Green?I，Amplifluor?and?TaqMantechnologies?for?specific?quantitative?detection?of?the?transgenic?maize?event?GA21.J.CerealSci.39，99-107；Shibata，D.，Seki，M.，Mitsukawa，N.et?al.(1998)Establishment?of?framework?P1?clones?for?map-based?cloning?and?genome?sequencing：direct?RFLP?mapping?of?large?clones.Gene，225，31-38；Stubner，S.(2002)Enumeration?of?16S?rDNA?of?Desulfotomaculum?lineage1?in?rice?field?soil?by?real-time?PCR?with?SybrGreenk?detection.J.Microbiol.Methods，50，155-164.)。