[發(fā)明專利]一種制備diaporthein B的方法及diaporthein B在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010594719.4
• 申請(qǐng)日: 2010-12-17
• 公開（公告）號(hào): CN102168119A
• 公開（公告）日: 2011-08-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李冬利;孫利;陳玉嬋;章衛(wèi)民;張慶波;王磊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東省微生物研究所
• 主分類號(hào): C12P15/00
• 分類號(hào): C12P15/00;A61K31/343;A61P35/02
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 余炳和

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及利用海洋真菌帚狀彎孢聚殼(Eutypella?scoparia)FS26發(fā)酵制備diaporthein?B的方法，以及化合物diaporthein?B在制備抗腫瘤藥物和作為抗腫瘤藥物活性成份方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤常稱癌癥，是一組嚴(yán)重威脅人類健康的常見病、多發(fā)病。據(jù)世衛(wèi)組織估計(jì)，如不進(jìn)行干預(yù)，2005年至2015年期間將有8400萬(wàn)人死于癌癥。并且，人口老齡化、吸煙人數(shù)增多、體育運(yùn)動(dòng)減少、飲食中缺少蔬菜水果等不良習(xí)慣可能進(jìn)一步導(dǎo)致全球癌癥人數(shù)猛增。國(guó)際癌癥研究中心的研究報(bào)告《世界癌癥報(bào)告》指出，根據(jù)目前癌癥的發(fā)病趨勢(shì)，2020年全世界癌癥發(fā)病率將比現(xiàn)在增加50％，全球每年新增癌癥患者人數(shù)將達(dá)到1500萬(wàn)人。因此，抗腫瘤藥物是目前世界上新藥開發(fā)的重點(diǎn)領(lǐng)域。我國(guó)衛(wèi)生部在第21屆世界抗癌大會(huì)上指出，中國(guó)每年癌癥發(fā)病人數(shù)約260萬(wàn)，死亡180萬(wàn)。過去30年中國(guó)癌癥死亡率增加了80％，癌癥已成為中國(guó)城市和農(nóng)村居民的第一位死因。隨著癌癥發(fā)病和死亡人數(shù)的持續(xù)增加，癌癥帶來的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和對(duì)社會(huì)發(fā)展的不良影響也日益突顯。

在惡性腫瘤的治療藥物中，天然產(chǎn)物發(fā)揮著重要的作用。根據(jù)美國(guó)國(guó)立腫瘤研究所(NCI)Newman?D.J.等的一項(xiàng)調(diào)查，1981年1月～2006年6月間，全世界推出的81個(gè)小分子抗癌藥物新化學(xué)實(shí)體(NCEs)中，77.8％可追溯到天然產(chǎn)物或天然產(chǎn)物給予的靈感[參見，Journal?ofNatural?Products，2007，70，461-477]。海洋中存在著許多自然條件特殊的環(huán)境，如高鹽、低溫或高溫、寡營(yíng)養(yǎng)、高壓等極端環(huán)境，特殊的生態(tài)環(huán)境也造就了海洋微生物特殊的生長(zhǎng)和代謝?機(jī)制，進(jìn)而產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎、活性獨(dú)特的代謝產(chǎn)物，為新藥開發(fā)提供了多樣的物種基礎(chǔ)和化學(xué)基礎(chǔ)。已成為近年來海洋天然產(chǎn)物特別是抗腫瘤天然產(chǎn)物研究的熱點(diǎn)。

本發(fā)明涉及的化合物diaporthein?B結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示：

式(I)

在文獻(xiàn)“Antimycobacterial?pimarane?diterpenes?from?the?fungus?Diaporthe?sp.，Bioorganic&Medicinal?Chemistry?Letters，2003，13，1253-1255”中，作者通過核磁共振波譜分析確定了本發(fā)明專利中的活性化合物diaporthein?B的結(jié)構(gòu)，并測(cè)試了其對(duì)結(jié)核桿菌Mycobacteriumtuberculosis的抑菌作用和對(duì)非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero?cell?line)的細(xì)胞毒作用，結(jié)果表明，該化合物具有很好的活性，對(duì)結(jié)核桿菌的最小抑菌濃度(MIC)為3.1μg/mL，對(duì)非洲綠猴腎細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC₅₀)為1.5μg/mL。在文獻(xiàn)“Pimarane?diterpene?and?cytochalasin?derivativesfrom?the?endophytic?fungus?Eutypella?scoparia?PSU-D44，Journal?of?Natural?Products，2006，69，856-858”中，把內(nèi)生真菌帚狀彎孢聚殼(Eutypella?scoparia)菌株P(guān)SU-D44進(jìn)行液體發(fā)酵28天，從其發(fā)酵產(chǎn)物中經(jīng)硅膠柱層析分離得到化合物diaporthein?B，并測(cè)試了它的抗菌活性，結(jié)果表明它對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC?25923的MIC值為87.8μM。

但到目前為止，在國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道中，均未涉及化合物diaporthein?B具有抗腫瘤活性的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種從海洋真菌帚狀彎孢聚殼(Eutypella?scoparia)FS26的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離純化出化合物diaporthein?B的方法，所述的帚狀彎孢聚殼(Eutypellascoparia)FS26，于2010年9月29日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，地址：中國(guó).武漢.武漢大學(xué)，其保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M?2010257。

所述的從海洋真菌帚狀彎孢聚殼(Eutypella?scoparia)FS26的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離純化出化合物diaporthein?B的方法，優(yōu)選通過以下方法制備：

(1)制備帚狀彎孢聚殼(Eutypella?scoparia)FS26的液體發(fā)酵培養(yǎng)物；