[發明專利]一株具誘導番茄抗南方根結線蟲的產黃青霉菌及應用

有效

• 申請號: 201010593046.0
• 申請日: 2010-12-17
• 公開（公告）號: CN102154114A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 段玉璽;姜美英;陳立杰;王媛媛;朱曉峰
• 申請（專利權）人: 沈陽農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/80
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明屬于微生物農藥技術領域，具體涉及一種誘導番茄抗南方根結線蟲的產黃青霉菌及應用。

背景技術：

植物寄生線蟲(Meloidogyne.spp.)是寄生于作物根部，嚴重危害世界農業生產的一類植物病原物，是許多國家重要農作物生產的限制因素之一。在我國該類線蟲對煙草、柑桔、番茄、棉花等多種重要作物造成了嚴重的危害。據估計，全世界主要農作物因植物寄生線蟲造成的年損失率為12.3％，每年造成約1000億美元的損失，但實際損失遠遠超過估計的。目前，在全世界范圍內，胞囊線蟲(Heterodera?sp.)和根結線蟲(Meloidoyne?sp.)是兩類嚴重危害多種重要作物的線蟲。在中國，南方根結線蟲(M.incognita)，爪哇根結線蟲(M.javanica)、花生根結線蟲(M.arenaria)和北方根結線蟲(M.hapla)是4優勢種。90％以上的植物根結線蟲病是由4優勢種引起的，特別是南方根結線蟲引起的。

國外在本世紀二十年代對線蟲所造成的損失就給予關注，四十年代生產出高效的殺線劑，但連續施用化學殺線劑后，出現了線蟲密度迅速回升的現象(J.N.薩塞，1985)，因而又必須增大施藥量，于是不僅農藥供應緊張，成本上升，尤其重要的是對人畜的危害和對環境的污染更趨嚴重。

針對生產上存在這一問題，通過系統篩選獲得一株真菌，利用該菌或該菌的代謝產物處理番茄種子，可誘導番茄在種子萌發和生長期間產生對南方根結線蟲的抗性，從而解決了番茄種植過程中使用化學農藥進行殺蟲帶來的高毒高殘留等問題，并能有效防止南方根結線蟲病害的發生和大流行。

發明內容：

本發明的目的是獲得一株可誘導番茄在種子萌發和生長期間產生對南方根結線蟲抗性的菌株，將菌株按常規液體發酵培養后，可以用該菌或該菌的代謝產物，開發出處理番茄種子的種子處理劑，經過處理的番茄種子可以使番茄產生對南方根結線蟲的抗性。

本發明篩選獲得的一株真菌菌株是產黃青霉(Penicillium?Chrysogenum)Snef?1216，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址：中國.北京市朝陽區北辰西路1號院3號；保藏日期：2010年12月15日；保藏登記入冊的編號CGMCC?NO.4469：。產黃青霉菌是從沈陽農業大學北方線蟲研究所實驗室保存的大量真菌菌株中篩選出的一株對番茄?具有強誘導活性的真菌菌株。產黃青霉(Penicillium?Chrysogenum)Snef?1216，該菌株是姜美英于2009年8月從中國遼寧省沈陽農業大學北方線蟲研究所保存的真菌菌株中篩選出的一個真菌菌株。

本發明通過研究發現，通過大量篩選試驗發現有很多株真菌都具有一定的活性，從這些真菌中篩選出一株性狀相對較好的菌株產黃青霉(Penicillium?Chrysogenum)Snef?1216進行了進一步的研究。

本發明還涉及用于誘導番茄種子的真菌代謝物，其是由本發明的真菌菌株產黃青霉(Penicillium?Chrysogenum)Snef?1216經過常規的液體發酵培養后提取制備的。

本發明的真菌菌株產黃青霉(Penicillium?Chrysogenum)Snef?1216是通過試管菌種培養后，再經擴大發酵培養來制備，其具體方法如下：

1.試管種培養

培養基配方為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)：馬鈴薯(去皮)200g，葡萄糖(或蔗糖)10g，瓊脂17-20g，水1000mL。

2.液體發酵培養

其中液體發酵培養基配方為：以重量百分比計，NaNO₃0.1％-0.3％、KH₂PO₄0.1％-0.2％、KCl?0.03％-0.8％、MgSO₄·7H₂O?0.05％-0.1％、FeSO₄?0.001％-0.002％、蔗糖2％-3％，瓊脂1.5％-2％、余下為蒸餾水，pH為7-9。

將試管種接種到250mL三角瓶(每瓶裝100mL)液體培養基中，25℃～28℃下，搖床轉速以150r·min^-1～180r·min^-1、發酵6-9d，優選8d。

液體發酵的菌種可以通過大型發酵罐進行規模生產，其產品為發酵液或發酵液的制成品。