[發(fā)明專利]尿液細(xì)胞分離芯片及試劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010592390.8
• 申請日: 2010-12-16
• 公開（公告）號: CN102564832A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫續(xù)國
• 申請（專利權(quán)）人: 孫續(xù)國;孫朝;邸寶華
• 主分類號: G01N1/38
• 分類號: G01N1/38;B01D21/26
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及測定尿細(xì)胞及有形成分分離的一種芯片和相關(guān)配套試劑。更具體的體現(xiàn)在，本發(fā)明設(shè)計(jì)了一種尿液細(xì)胞、尿液管型以及尿液鹽類結(jié)晶等有形成分分離芯片，并配有一種分離試劑，能夠?qū)⒛蛞褐屑?xì)胞、管型等有機(jī)有形成分與鹽類結(jié)晶等進(jìn)行分離，應(yīng)用于尿液分析儀器中尿液細(xì)胞、管型等有形成分的分類和數(shù)量測定的裝置。?

背景技術(shù)

尿液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型等與尿液鹽類結(jié)晶均具有一定形態(tài)，均屬于尿液中的有形成分。關(guān)于尿液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、大圓上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞、透明管型、細(xì)胞管型以及鹽類結(jié)晶的分類和數(shù)量測定，對于泌尿系疾病的診斷和治療效果觀察具有重要臨床價值。因此，尿液分析儀器公司一直致力于尿液有形成分的分析技術(shù)的研發(fā)。目前關(guān)于尿液中有形成分的分析儀器，主要依靠尿液有形成分高速攝像技術(shù)或尿液流式細(xì)胞分離技術(shù)兩種測定裝置，對于尿液中尿液細(xì)胞等有形成分進(jìn)行分類和數(shù)量測定。基于攝影技術(shù)的尿液分析儀，對于鑒別尿液細(xì)胞等有形成分準(zhǔn)確率較高，但是對于尿液中有形成分的數(shù)量測定準(zhǔn)確率低。而基于流式細(xì)胞分離技術(shù)的尿液分析儀，對于尿液中有形成分的數(shù)量測定準(zhǔn)確?率高，但是對于尿液細(xì)胞等有形成分的鑒別能力低，容易造成尿液紅細(xì)胞與鹽類結(jié)晶等錯誤辨認(rèn)，造成結(jié)果準(zhǔn)確率低和重復(fù)性差。本發(fā)明技術(shù)彌補(bǔ)了上述兩種分析方法的不足，能夠準(zhǔn)確鑒別尿液細(xì)胞等有形成分和對尿液細(xì)胞進(jìn)行定量分析。?

1983年，美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司(international?remote?imaging?systems?Co，Ltd)研制了世界上第一臺“YollowIRIS”高速攝影式的尿液分析儀。這種儀器是將尿液中細(xì)胞、管型等有形成分展示在計(jì)算機(jī)熒屏上，由掌握尿液有形成分形態(tài)學(xué)特點(diǎn)的專家進(jìn)行鑒別和分類。1990年，美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司與日本東亞醫(yī)療電子有限公司聯(lián)合生產(chǎn)了，影像流式細(xì)胞技術(shù)UA-100型尿液分析儀，用于尿液中細(xì)胞、管型等有形成分的分類和定量測定。雖然該儀器對原來的尿液分析儀進(jìn)行了改革，但尿液細(xì)胞等有形成分的分類處理能力低，重復(fù)性差，尿液管型分辨不清。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是克服了尿液流式細(xì)胞芯片技術(shù)對于尿液管型、尿液細(xì)胞辨別能力低、重復(fù)性差和高速攝影技術(shù)對于尿液細(xì)胞等有形成分定量測定能力低的缺點(diǎn)。提供了一種首先將尿液中細(xì)胞、尿液管型和尿液鹽類結(jié)晶等有形成分進(jìn)行分離和分類，然后分別對于尿液中有形成分進(jìn)行定量分析的芯片技術(shù)。?

本發(fā)明提出解決上述技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是：本發(fā)明對于尿液中細(xì)胞、管型和鹽類結(jié)晶等有形成分進(jìn)行分離的芯片，首先將尿液存放于芯片的中心部位(圖1)。芯片中心部位(1)結(jié)構(gòu)為體積?100-500ul的圓形槽狀結(jié)構(gòu)，其槽的壁(2)上有四個缺口(14、16、18和20)，在外壁上配有緊密包裹的帶有四個缺口(13、15、17和19)的橡皮圈，轉(zhuǎn)動橡皮圈使橡皮圈上的缺口與芯片中心部位缺口重合時，借助離心力能夠從中心部位進(jìn)入其外圍的高比重分離緩沖液(4)。儲存外圍高比重分離緩沖液的芯片(4)同樣為圓形槽狀結(jié)構(gòu)，包圍于中心芯片(1)的外圍，其外壁同樣有四個缺口(21、23、25和27)，尿液中有形成分能夠通過缺口進(jìn)入四個有形成分收集器。該配套高比重分離緩沖液的化學(xué)成分為5％-50％蔗糖/磷酸緩沖液，pH7.4。將分離芯片存放于一個馬達(dá)上，加給芯片50-2000rpm/min轉(zhuǎn)速的旋轉(zhuǎn)，尿液中細(xì)胞、管型和鹽類結(jié)晶等有形成分，借助離心力從中心芯片向外層芯片進(jìn)行分離，有形成分分別收集到(9、10、11和12)四個收集器內(nèi)。然后根據(jù)加入尿液的量計(jì)算尿液中有形成分的數(shù)量和分類的種類。?

有形成分收集器為最層三角形或圓形收集器，分別是：9、10、11、12四個。根據(jù)尿液有形成分的大小、比重分離有形成分分別進(jìn)入9、10、11和12等四個收集器，使尿液中細(xì)胞等有形成分進(jìn)行初步分離。?

芯片部分包括芯片框架和芯片底板。芯片框架為塑料材料制成框架結(jié)構(gòu)，芯片底板為玻璃、有機(jī)塑料、石英玻片。在底板上附框架，框架(2、5、7)高度為2mm，芯片壁上合包裹于芯片壁上的橡皮圈的缺口，高度與芯片框架高度相同，去口長度為6-10mm。在框架和底片之間利用粘合劑將一層尼龍薄膜粘合在上述兩框架之間或利用微刻融技術(shù)制備微芯片。?

本法將尿液中細(xì)胞、管型和鹽類結(jié)晶等有形成分初步劃分成四個類型，每種類型根據(jù)尿液有形成分的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，再進(jìn)行劃分類型。根據(jù)收集的每種有形成分進(jìn)行形態(tài)學(xué)成分的數(shù)量測定。?

附圖說明

本說明書包括四幅附圖?