[發明專利]一種AGT和ACE基因多態性檢測特異性引物和液相芯片

有效

• 申請號: 201010591008.1
• 申請日: 2010-12-16
• 公開（公告）號: CN102559852A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 許嘉森;秦會娟;郭婧;劉志明
• 申請（專利權）人: 廣州益善生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;胡杰

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，涉及醫學和生物技術，具體的是涉及一種AGT和ACE基因多態性檢測特異性引物和液相芯片。

背景技術

腎素-血管緊張素-醛固酮(renin-angiotensin?system，RAS)是一個激素系統，該系統對血壓、血流和內環境調節起著重要的作用，其中，血管緊張素原和血管緊張素轉換酶是RAS系統的關鍵組成部分。

血管緊張素原(Angiotensinogen，AGT)是一種主要由肝臟持續合成并釋放入血液循環的α-2球蛋白，AGT的主要功能是作為腎素的底物在調節血壓上發揮重要作用。血管緊張素轉換酶(Angiotensin-Converting?Enzyme，ACE)又稱二肽羧基肽酶，ACE的主要作用是將血管緊張素I轉化為具有強烈縮血管作用的血管緊張素II。在血循環，AGT被腎素水解生成無活性的血管緊張素I(Ang?I，10肽)，后者在肺等器官內皮細胞ACE作用下，從Ang?I?C端切除兩個氨基酸生成具有血管收縮活性的8肽，即血管緊張素II(Ang?II)。血管緊張素II除具有刺激血管收縮引起血壓升高的作用外，還具有促進醛固酮分泌，引起Na+貯留活性。此外ACE還能夠催化有促血管舒張作用的緩激肽水解，ACE活性水平的增高刺激了血管平滑肌細胞的增生和細胞外基質的形成，是ACE基因多態性的重要病理生理基礎。

人血管緊張素原(AGT)的基因全長13kb，含5個外顯子和4個內含子，位于染色體1q42～43區，AGT的cDNA由1455個核苷酸組成，編碼含有485個氨基酸的蛋白質。研究表明，AGT基因中存在某些突變，該突變可引起血漿AGT水平輕度增加，導致Ang?I和AngII增加，最終引起血壓升高。

本發明目標檢測的AGT基因突變位點，如表所示：

??序號??AGT位點突變的內容??簡寫??1??SEQ?ID?NO.33的第185位核苷酸，發生T→C突變??T185C??2??SEQ?ID?NO.34的第75位核苷酸，發生A→G突變??A75G??3??SEQ?ID?NO.35的第99位核苷酸，發生C→T突變??C99T

血管緊張素轉換酶編碼基因(ACE)位于17號染色體q23位點，長度為21kb，由26個外顯子和25個內含子組成。其中第16內含子存在一段287bp的DNA序列插入(insertion，I)或缺失(deletion，D)，構成ACE基因的I/D多態性(rs1799752)，因此ACE基因可分為3中基因型：缺失純合子(DD)型、缺失與插入雜合子(ID)型和插入純合子(II)型。研究表明，ACE基因I/D多態性與血清及組織中ACE濃度密切相關，ACE的D等位基因數目增多與ACE濃度呈正比。目前研究表明，血管緊張素轉換酶基因I/D多態性與心腦血管疾病易感性、嚴重性及預后顯著相關。