[發(fā)明專利]一種芒屬植物奇崗體胚組培快速繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010589929.4
• 申請(qǐng)日: 2010-12-15
• 公開（公告）號(hào): CN102090339A
• 公開（公告）日: 2011-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 刁英;胡中立;趙玲玲;胡暉;胡小虎;周發(fā)松
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北光芒能源植物有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術(shù)領(lǐng)域

??本發(fā)明涉及奇崗（Miscanthus?giganteus）基于胚性愈傷的組培快繁技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種芒屬植物奇崗體胚組培快速繁殖方法，它適用于以奇崗幼穗為外植體通過愈傷誘導(dǎo)途徑獲得幼苗，以及增殖、生根、馴化與移栽。

背景技術(shù)

?奇崗（Miscanthus×giganteus）是一個(gè)天然雜交種三倍體(3n=57)，可能是由荻(2n=78)和芒(2n=38)雜交而產(chǎn)生的。這個(gè)種在形態(tài)上更類似于荻，主要特征是小穗第1外稃無芒，稈直立。只是它的根狀莖叢集性較強(qiáng)，為荻和芒之間的過渡類型。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，奇崗原產(chǎn)地可能為日本，但迄今尚未發(fā)現(xiàn)其自然群落，在中國(guó)也未發(fā)現(xiàn)其自然分布。目前，在國(guó)內(nèi)外許多研究機(jī)構(gòu)都種有奇崗。它對(duì)生長(zhǎng)條件的要求很低，為C₄植物，光合效率高，植株高大。稈的高度較為均一，類似于荻；稈的密度較大，類似于芒。所以在一定的生長(zhǎng)條件下，奇崗?fù)梢垣@得更高的生物產(chǎn)量。依據(jù)現(xiàn)有的資料，在中歐地區(qū)奇崗的干物質(zhì)產(chǎn)量可達(dá)20?t／hm²以上，在南歐地區(qū)可達(dá)30?t／hm²以上。這種植物為旱生植物，再生能力很強(qiáng)，栽培容易，每年可以只收不種，生產(chǎn)成本低。它的纖維含量達(dá)68％～70％，纖維品質(zhì)好，強(qiáng)度大，灰分含量?jī)H為3％，可以制造優(yōu)質(zhì)紙漿、板材等等。另外在工業(yè)污染廢地和其它邊際土地的改造過程中，也發(fā)揮著重要的作用。

?由于奇崗是三倍體植物，不能依靠種子繁殖，這在一定程度上限制了該種的新品種培育，所以利用無性繁殖即組培快繁技術(shù)得到植株以及在此基礎(chǔ)上進(jìn)行誘變育種、利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行遺傳改良顯得尤為重要。國(guó)內(nèi)關(guān)于芒屬植物的組培快繁技術(shù)，在20世紀(jì)90年代就有相關(guān)報(bào)道，他們分別采用了幼葉、下胚軸、幼根、幼穗作為外植體進(jìn)行芒屬植物的快繁技術(shù)，但其岀愈率和分化率都各不相同，以幼穗的繁殖效率最高，但其文章中并未明確指出得到的愈傷為胚性愈傷。奇崗的組培快繁體系在國(guó)外也有相關(guān)報(bào)道，但主要是利用誘導(dǎo)叢生芽進(jìn)行快繁，其繁殖效率都不如本發(fā)明高，本發(fā)明得到了更加高效快速的體胚快繁體系，為快速繁殖奇崗種苗提供了技術(shù)支持，同時(shí)為誘變育種、轉(zhuǎn)基因育種提供了基本的組培體系，促進(jìn)了奇崗的遺傳改良。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是在于提供了一種芒屬植物奇崗體胚組培快速繁殖方法，方法易行，操作簡(jiǎn)便，短時(shí)間內(nèi)提高了奇崗的快繁效率和繁殖系數(shù)。

為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施：

本發(fā)明建立了基于胚性愈傷的奇崗組培快繁體系，增值率高（4-5倍），增值穩(wěn)定，根系健壯，移栽成活率高，是適于商業(yè)擴(kuò)繁奇崗的成熟技術(shù)。

一種芒屬植物奇崗體胚組培快速繁殖方法，其步驟是：

A、幼穗選取：選取處于潁花原基形成期的幼穗，中軸也比較軟，還沒形成基本的分支。?

B、?初代誘導(dǎo)：將其剪成2-3厘米小段，先用75%（體積比）酒精消毒（30-35秒），然后用0.1%（質(zhì)量比）氯化汞浸泡（3-5分鐘），再用無菌水沖洗（3-5次），將其接種在幼穗的初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。經(jīng)過（30-35天）的初代誘導(dǎo)，獲得胚性愈傷。培養(yǎng)條件為24-28℃，每天光照（14-16）小時(shí)（人工光源，下同），光強(qiáng)為2000LX。誘導(dǎo)初代培養(yǎng)基為以下培養(yǎng)基任選其一A：MS培養(yǎng)基附加6-芐基腺嘌呤6-BA1-2mg/L，2,4二氯苯氧乙酸2，4-D1-5mg/L，蔗糖30g/L,?PhytagelR?3g/L或B：MS培養(yǎng)基附加6-芐基腺嘌呤6-BA1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2，4-D1?-4?mg/L，6水氯化鎂MgCl₂·6H₂O800mg/L,蔗糖30g/L，?PhytagelR?3g/L。采用這兩種培養(yǎng)基中的任何一種培養(yǎng)基都能誘導(dǎo)出狀態(tài)良好的胚性愈傷組織，生長(zhǎng)9-11天在幼穗基部開始岀愈，愈傷狀態(tài)良好，為白色或淡黃色松散愈傷。?