[發(fā)明專利]一種綠色木霉菌株及其代謝物的應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010589866.2
• 申請日: 2010-12-15
• 公開（公告）號: CN102168019A
• 公開（公告）日: 2011-08-31
• 發(fā)明（設計）人: 劉付香;梁炫強;李玲;李少雄;周桂元;洪彥彬;溫世杰
• 申請（專利權）人: 廣東省農業(yè)科學院作物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;C12R1/885
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉

技術領域

本發(fā)明特別涉及一種綠色木霉菌株及其代謝物的應用，屬于微生物和農業(yè)領域。

背景技術

花生(Arachis?hypogaea?L.)是我國重要的油料和經濟作物，其種植面積和生產總量居世界前列，在國際上具有很強的競爭力。一直以來，花生特別容易受黃曲霉毒素污染，受污染后的花生不但產量和品質大大下降，還嚴重威脅人類的生命健康，因此如何合理有效地防治花生免受黃曲霉毒素污染是提高花生出口貿易的重要問題。

黃曲霉(Aspergillus?flavus)存在于霉變的花生中，在生長后期，黃曲霉產生次生代謝產物黃曲霉毒素(Aflatoxins)，對人體和畜禽的組織器官產生毒性傷害，誘發(fā)癌癥。

由于黃曲霉能在比較惡劣的環(huán)境下生長，因此控制黃曲霉及其毒素的污染比較困難。農業(yè)上防治真菌及其毒素對食品污染的主要途徑是遵守良好的農業(yè)生產操作規(guī)范，選擇抗真菌的優(yōu)良品種，但由于黃曲霉毒素是一種次級代謝產物，其產生量受環(huán)境影響十分嚴重，所以田間的預防措施也不能完全避免黃曲霉毒素的污染。收獲后儲藏過程中采取措施，如化學防霉等可抑制或延緩微生物的生長，但防霉效果不是很理想，而且化學防霉劑對人和動物有諸多潛在的危害。由于黃曲霉毒素對熱不敏感，100℃處理20h黃曲霉毒素都不會被破壞，巴氏消毒也不能去除毒素的污染，因此采取預防措施是避免黃曲霉毒素的最佳辦法。但目前還缺少真正有效、經濟、操作性強的防霉去毒措施，因此從安全的角度出發(fā)，考慮利用微生物之間的拮抗作用，探索生物控制方法以預防真菌的生長與產毒具有重要意義。

盡管目前已經篩選到的抗黃曲霉化合物有很多，但真正能夠投入實踐中應用的卻很少，篩選出的微生物對黃曲霉的拮抗效果也不太理想，且成本較高，現(xiàn)急需尋找新的拮抗菌來抑制黃曲霉的生長。

發(fā)明內容

本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術的缺點與不足，提供一種綠色木霉菌株。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種降低花生收獲前黃曲霉毒素污染的制劑，該制劑含有上述綠色木霉菌株。

本發(fā)明的再一目的在于提供所述降低花生收獲前黃曲霉毒素污染的制劑的制備方法和應用。

本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)：一種綠色木霉(Trichoderma?viride)菌株，名稱為綠色木霉GZ101，于2010年11月4日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號為CCTCC?M?2010291。

所述綠色木霉菌株應用于防治黃曲霉素的污染。

一種降低花生收獲前黃曲霉毒素污染的制劑，含有上述綠色木霉菌株的代謝物；

所述降低花生收獲前黃曲霉毒素污染的制劑的制備方法，包含以下步驟：將綠色木霉菌株接種到PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)液體培養(yǎng)基中，進行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵上清即為降低花生收獲前黃曲霉毒素污染的制劑。

所述的PDA液體培養(yǎng)基的組成為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，pH6.8，蒸餾水定容至1000ml；

所述的發(fā)酵條件可用現(xiàn)有技術中木霉的搖瓶發(fā)酵條件和發(fā)酵罐發(fā)酵條件，搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)的條件優(yōu)選為接種量10⁵～10⁷個孢子/100ml培養(yǎng)基，28～30℃，200rmp搖菌培養(yǎng)5～8天；

所述制劑應用于降低花生收獲前黃曲霉毒素污染，具體步驟包括：將所述制劑直接噴灑于收獲前2周的花生土壤中或是將所述制劑稀釋或濃縮后噴灑于收獲前2周的花生土壤中均可。

本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術具有如下的優(yōu)點及效果：

本發(fā)明提供了一種能有效拮抗黃曲霉生長的綠色木霉菌株。該綠色木霉菌株的代謝物噴灑于花生種植土壤中，能有效地降低花生收獲前黃曲霉毒素污染，降低率達97％。

附圖說明

圖1是GZ101制劑對黃曲霉毒素B1的降解作用圖。

圖2為GZ101制劑對土壤黃曲霉種群數(shù)的影響圖。

具體實施方式

下面結合實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。

實施例1

(1)綠色木霉菌株的分離及鑒定

①分離土樣取自廣東省汕頭市花生種植田土壤。稱取土樣10g，放入盛有100ml無菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中，振蕩搖勻10min使土和水充分混合。在無菌操作條件下，用移液槍從三角瓶中吸取1ml，加入另一盛有9ml無菌水的試管中，混合均勻，依此類推分別制成10^-2、10^-3、10^-4不同稀釋度的土壤溶液。