[發明專利]酵母水解專用復合酶及其制備方法

有效

• 申請號: 201010584810.8
• 申請日: 2010-12-13
• 公開（公告）號: CN102115734A
• 公開（公告）日: 2011-07-06
• 發明（設計）人: 劉漢靈;黃月桂
• 申請（專利權）人: 南寧龐博生物工程有限公司
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;A23L1/221
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114
• 代理人: 鄒超賢

1.一種酵母水解專用復合酶，其特征在于：包括β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、糖化酶、內切酶、外切酶、風味酶和磷酸二酯酶，其成份及其重量份數為：β-葡聚糖酶為1～30份，甘露聚糖酶為1～30份，糖化酶為1～30份，內切酶為15～65份，外切酶為1～10份，風味酶為1～10份，磷酸二酯酶為1～10份。

2.根據權利要求1所述的酵母水解專用復合酶的制備方法，其特征在于：先將β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、糖化酶、內切酶、外切酶、風味酶和磷酸二酯酶分別經過發酵、提取、凍干、粉碎，然后按配方設計比例混合均勻得到酵母水解專用復合酶，其工藝過程為：

(1)β-葡聚糖酶的制備：以大豆或豆粕或麥麩為原料，采用綠色木霉(Trichoderma?viride)菌種或黑曲霉(Aspergillus?niger)菌種按常規方法制備得到，保存備用；

(2)甘露聚糖酶的制備：以大豆或豆粕或麥麩為原料，采用綠色木霉(Trichoderma?viride)菌種或黑曲霉(Aspergillus?niger)菌種按常規方法制備得到，保存備用；

(3)糖化酶的制備：以大豆或豆粕或麥麩為原料，采用綠色木霉(Trichoderma?viride)菌種或黑曲霉(Aspergillus?niger)菌種按常規方法制備得到，保存備用；

(4)內切酶的制備，內切酶的制備，以木瓜蛋白酶制備為例，從木瓜樹或果實取下新鮮木瓜漿，先用自來水或蒸餾水或去離子水沖稀或溶解木瓜乳膠，然后通過凍融提取，再經微濾、超濾濃縮、真空冷凍干燥、粉碎得到木瓜蛋白酶，保存備用；中性蛋白酶、堿性蛋白酶的制備，按常規方法經發酵提取得到；

(5)外切酶的制備，以大豆或豆粕或麥麩為原料，粉碎，滅菌，加入米曲霉(Aspergillus?oryzae)或米根霉(Rhizopus?oryzae)、黑曲霉(Aspergillus?niger)菌種，在30～50℃、70～90％的濕度條件下發酵1～5天，然后提取、微濾、超濾、凍干、粉碎得到，保存備用；

(6)風味酶的制備，以大豆或豆粕或麥麩為原料，粉碎，滅菌，加入毛霉(Actinomucor?elegans)、米曲霉(Aspergillus?oryzae)等菌種，在25～45℃、70～90％的濕度條件下發酵1～4天，然后提取、微濾、超濾、凍干、粉碎得到，保存備用；

(7)磷酸二酯酶的制備，以大豆或豆粕或麥麩為原料，粉碎，滅菌，加入桔青霉(Penicillium?citrinum)菌種，在25～45℃、70～90％的濕度條件下發酵1～4天，然后提取、微濾、超濾、凍干、粉碎得到，保存備用；

(8)將上述制備好的β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、糖化酶、內切酶、外切酶、風味酶和磷酸二酯酶，按配方設計成份及其重量份數混合均勻得到酵母水解專用復合酶。

3.根據權利要求1所述的酵母水解專用復合酶，其特征在于：所述的β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、糖化酶，是通過綠色木霉菌種或黑曲霉菌種發酵制備提取得到，其中β-葡聚糖酶酶活力為1000～100000u/g，甘露聚糖酶酶活力為5000～200000u/g，糖化酶酶活力為5000～200000u/g。

4.根據權利要求1所述的酵母水解專用復合酶，其特征在于：所述的內切酶，包括木瓜酶、中性蛋白酶和堿性蛋白酶的混合物，混合比例為0～5∶0～5∶0～5，其總酶活力為10000～800000u/g。

5.根據權利要求1所述的酵母水解專用復合酶，其特征在于：所述的外切酶，包括米曲霉或米根霉、黑曲霉中的一種或多種菌種發酵制備得到的生物酶，其酶活力為1000～50000u/g。

6.根據權利要求1所述的酵母水解專用復合酶，其特征在于：所述的風味酶，包括毛霉、米曲霉菌中的一種或兩種菌種發酵制備得到的生物酶，其酶活力為1000～50000u/g。

7.根據權利要求1所述的酵母水解專用復合酶，其特征在于：所述的磷酸二酯酶，是從桔青霉發酵物提取得到的磷酸二酯酶，其酶活力為1000～70000u/g。