[發明專利]一種微小RNA及其反義核酸在診斷、預防、治療和/或預后評估心臟疾病中的用途

有效

• 申請號: 201010558013.2
• 申請日: 2010-11-22
• 公開（公告）號: CN102115787A
• 公開（公告）日: 2011-07-06
• 發明（設計）人: 李培峰;王昆;龍波
• 申請（專利權）人: 中國科學院動物研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/113;A61K48/00;A61P9/00;A61P9/10;A61P9/04;A61P9/12
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅

技術領域

本發明屬于生物醫藥工程領域，涉及一種內源性的非編碼小RNA及其反義核酸的新用途，具體涉及一種微小RNA(microRNA，miRNA)及其反義核酸在診斷、預防和/或治療心臟疾病中的用途。

背景技術

心血管疾病主要包括高血壓、冠心病、充血性心力衰竭等。目前，心血管疾病仍然是人類健康的頭號殺手，全世界范圍內每年有一千七百萬人死于心血管疾病，其死亡率已接近所有癌癥死亡率的總和。在我國，隨著人民生活水平日益提高和飲食結構的改變，心血管疾病死亡率呈明顯上升趨勢，已超過癌癥成為第一大致死原因。毫無疑問，預防和治療心血管疾病仍然是醫學與生物學的重大任務。

心肌肥大是指組織水平上心肌組織的增厚和細胞水平上心肌細胞體積的增大的總稱。它是由于心肌細胞體積增大而導致心臟體積增大所發生的一種疾病。該病是由一些生理和病理因素的共同刺激而發生的，它是許多心血管疾病的綜合性表現。心肌肥大是心肌病的一種，是心肌細胞針對于血液動力學增加的一種應答反應。多種情況可以引起人體內血液動力的增加，比如高血壓，心臟瓣膜疾病。長期的超負荷血液動力刺激會引起以心肌細胞體積增大為特征的心肌細胞重塑過程，也就是心肌肥大?，F在一般認為存在兩種情況的心肌肥大，一種是正常的生理性肥大，比如出生后伴隨者發育發生的心肌肥大，還有體育鍛煉引起的心肌肥大；另外一種是病理性心肌肥大，其早期特征是室壁和室間隔增厚，心肌收縮功能增強，因此被視為代償性肥大，如果病情一直未得到緩解，心肌肥大后期會發生心室壁間質纖維化、心肌細胞收縮功能失調以及能量代謝，基因表達和電生理特征的異常，最終導致心臟功能衰竭。鑒于心肌肥大的發生是一個進行性不可逆過程，而且最終會引起心力衰竭，現代醫學已經把它作為心臟?發生臨床病變的一個里程碑式的心肌形態變化，認為它是導致心臟疾病和心臟猝死的一個危險因素。

隨著近來miRNA研究的熱潮，這種內源性非編碼小RNAs已經作為一個基因表達調節的中心因子顯露，參加許多重要的生理過程。對于miRNA來說，其調控方式的特點決定了它的靶基因不會只有一個，而是一對多的方式，這就是使得miRNA的功能研究內容非常豐富。許多研究表明，miRNA對于維持心臟正常生理功能具有重要作用，心臟中的miRNA異常表達與許多心臟疾病的發生相關。因此，將miRNA作為心臟疾病治療的靶點，開發相關藥物具有潛在的臨床應用價值。

盡管越來越多的miRNA作為人類疾病的生物標志物及治療靶點被發現，但在心臟肥厚和心肌纖維化等心臟疾病中的關鍵miRNA仍沒有確定，其所發揮的功能是對該領域科研人員的挑戰。

發明內容

本發明的目的是確定或發現調控心肌細胞肥大的在心臟中表達的微小RNA(miRNA)，進一步確定其在心肌肥大、冠心病、心肌纖維化等心臟疾病中的關鍵作用，將其應用到這些心臟疾病的診斷、防治中。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的。

一方面，本發明提供一種微小RNA及其反義核酸在制備用于診斷、預防、治療和/或預后評估心臟疾病的藥物或試劑盒中的用途，其中所述微小RNA為包含以下序列的核苷酸或者其生物活性功能片段或變體：5’-UGUCAGUUUGUCAAAUACCCCA-3’(SEQ?ID?NO.1)。

優選地，所述微小RNA反義核酸為包含以下序列的核苷酸或者其生物活性功能片段或變體：5’-UGGGGUAUUUGACAAACUGACA-3’(SEQ?IDNO.2)。

優選地，所述心臟疾病選自心肌肥大、心肌纖維化、冠心病、心肌炎、心瓣膜疾病、高血壓和心衰。

另一方面，本發明提供一種用于診斷和/或預后評估心臟疾病的試劑盒，所述試劑盒包含用于特異性檢測微小RNA的探針或引物，其中所述微小RNA為包含以下序列的核苷酸或者其生物活性功能片段或變體：5’-UGUCAGUUUGUCAAAUACCCCA-3’(SEQ?ID?NO.1)。

優選地，所述試劑盒中包含的探針或引物具有以下所示的序列：?5’-UGUCAGUUUGUCAAAUACCCCA-3’(SEQ?ID?NO.1)。

本發明還提供了一種用于預防和/或治療心臟疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的微小RNA反義核酸和藥學上可接受的病毒、載體或輔料，其中所述微小RNA反義核酸為包含以下序列的核苷酸或者其生物活性功能片段或變體：5’-UGGGGUAUUUGACAAACUGACA-3’(SEQ?ID?NO.2)。

優選地，所述藥物組合物中微小RNA反義核酸的含量為0.5-1克。