[發明專利]拐棗多糖的分離純化方法

無效

• 申請號: 201010557750.0
• 申請日: 2010-11-25
• 公開（公告）號: CN102477104A
• 公開（公告）日: 2012-05-30
• 發明（設計）人: 李法慶;劉東鋒
• 申請（專利權）人: 蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明涉及一種拐棗多糖的分離純化方法，屬于中藥技術領域。

背景技術：

拐棗(Hovenia?cerba?Lindl.)為鼠李科拐棗屬落葉喬木，俗稱椇子、鉤子、雞腳爪、萬字果、萬壽果、龍爪。它全身都是寶，是一種果、藥、材兼用的名貴樹，有廣闊的開發前景。果實中含葡萄糖及蘋果酸鈣，種子含枳椇皂苷，具有鎮靜、抗驚厥和降血壓等功效。肉質可治風濕，有清熱利利尿止渴降火解毒功效，樹皮可活血，舒筋解毒，果梗性甘平，有健胃補血的作用，無毒，主治頭風，潤五臟利大小便。木質部含二羧酸三萜類化合物枳椇子酸(Hobeniaaced，C₃₀H₈₀O₅)。朱炯波等采用蒽酮-硫酸比色法測定其多糖含量為13.83％，目前國內外對拐棗活性多糖的作用研究尚未見報道。

多糖是天然有機化合物中的大分子物質，某些活性多糖有抗腫瘤和增強免疫功能的作用，一些多糖則具有復雜的控制細胞分裂和分化、調節細胞生長與衰老等多方面功能，改性的多糖則有抗HIV感染的作用，一些重要的生理過程如炎癥反應，受體識別，免疫反應等都與多糖分子密切相關。已有的大量藥理研究表明，植物多糖，特別是中藥中的多糖具有免疫調節、抗腫瘤、抗病毒、抗感染、降血糖等多種生理活性，其原生藥大多屬補益類中藥。雖然目前有很多合成化療藥物，但它們在殺死癌細胞的同時也同樣累及正常細胞，臨床上表現出很多副作用，特別是化療藥物對患者的免疫系統造成損害，但植物藥的遺傳毒性不太明顯，表明中草藥在抗癌抗突變方面有其獨特的優勢和廣闊的應用前景。因此，多糖類免疫調節劑在腫瘤上的治療很有吸引力。

離子交換樹脂是一種多孔性交聯聚合物，具有較高的比表面積，因而具有優良的吸附能力。離子吸附樹脂屬于兩相結構：聚合物相和孔。聚合物相是由眾多的納米級聚合物微粒堆積而成的，微粒之間是孔。通過調整合成的方法可以調節為例大小，已寄孔徑和比表面積等，從而使樹脂具有不同的吸附性能。此外，吸附樹脂按表面性質又可分為非極性、中極性、極性和強極性四種。不同的表面性質使吸附樹脂具備不同的吸附機理和吸附性能，因此使樹脂獲得多方面的用途。有研究表明，用交換樹脂代替常用的活性炭進行脫色，不但可加快過濾速度，而且脫色效果也好，同時還達到去雜的目的，從而提高產品的質量。樹脂除脫色外，同時具有離子作用，能與溶液中的離子起離子交換反應，加上通用樹脂還有較強的配位體基團(-OH、-NH3)，能對金屬離子起絡合作用，從而除去溶液中的金屬離子，起著去雜的作用。

現有多糖脫色技術常采用活性炭脫色，雖價格低廉，但操作時必須使用粉末活性炭，存在脫色后溶液中的炭殘渣難以完全出去的致命缺點；雙氧水脫色需目的產物具有穩定性、不易氧化的特點，但由于雙氧水脫色法是直接氧化提取液中的色素，并未脫除，且有可能將多糖鏈狀結構破壞，氧化后的色素仍然作為雜質留在提取液中，并不能保證其最后品質。本發明采用離子交換樹脂處理能力大，范圍廣，脫色率高，使得多糖保留率高，可再生重復利用，成本較低。

發明內容：

本發明的目的是在于提供一種拐棗多糖的分離純化方法，從拐棗中經熱水浸提、醇沉、離心DEAE纖維素柱層析除雜、離子交換樹脂柱脫色、半透膜透析并干燥得成品。該方法提取得到較高純度的拐棗活性多糖。

為達到上述目的，本發明采用了以下技術措施：

拐棗多糖的分離純化方法，其特征在于包括下列步驟：

(1)多糖提取液制備：將拐棗粉碎，加熱水浸提2-3次，浸提24-48小時，過濾，合并浸提液，濃縮得拐棗浸膏；

(2)醇沉：將拐棗浸膏加入3-5倍80-90％的食用乙醇攪拌5-15分鐘后靜置沉淀，離心過濾除去上清液，收集沉淀物；

(3)除雜、脫色：將離心沉淀物用熱水攪拌溶解，上DEAE纖維素柱，0-0.5mol/LNaCl溶液梯度洗脫，再上離子交換樹脂柱吸附脫色，下柱液過濾后用半透膜透析，干燥即得成品。

所述步驟(2)中離心機的轉速為5000-10000rpm。

所述步驟(3)中纖維素柱采用DEAE-23、DEAE-52。

所述步驟(3)中離子交換樹脂可選苯乙烯系樹脂和丙烯酸系樹脂或兩者混合樹脂。苯乙烯系樹脂可采用Asmit?265P、Duolite?A171P陰離子樹脂；丙烯酸系樹脂可采用Asmit295、DoliteA172、IRA958S、A860陰離子樹脂。

所述步驟(3)中半透膜為截留分子量4000-10000的半透膜透析袋，透析24-48小時。