[發明專利]一種遲緩愛德華氏菌表面展示型疫苗及其制備和應用有效
| 申請號： | 201010552404.3 | 申請日： | 2010-11-12 |
| 公開（公告）號： | CN102028940A | 公開（公告）日： | 2011-04-27 |
| 發明（設計）人： | 孫黎;孫云 | 申請（專利權）人： | 中國科學院海洋研究所 |
| 主分類號： | A61K39/02 | 分類號： | A61K39/02;C12N1/21;C12N15/31;A61P31/04 |
| 代理公司： | 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002 | 代理人： | 許宗富;周秀梅 |
| 地址： | 266071*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 遲緩 愛德華 表面 展示 疫苗 及其 制備 應用 | ||
1.一種遲緩愛德華氏菌表面展示型疫苗，其特征在于：表面展示型疫苗為序列表SEQ?ID?No.1中的堿基序列所示。
2.一種權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌表面展示型疫苗的制備方法，其特征在于：菌株DH5α/pSA1的構建：以遲緩愛德華氏菌TX1為模板，采用F1和R1為引物進行PCR擴增，PCR產物用NdeI/XhoI雙酶切回收2.3kb，待用；而后將質粒pBT3用NdeI/XhoI雙酶切回收4.5kb片段，將回收的兩片段用T4DNA連接，連接液轉化入大腸桿菌DH5得菌株DH5α/pSA1，即得表達序列表SEQ?ID?No.1中的堿基序列所編碼的遲緩愛德華氏菌疫苗蛋白的疫苗菌株；
所述引物為F1：5’-GATCATATGGCAGATGGTTTCGTAGTGA-3’和R1：5’-AGTACTCTCGAGCCAGGTTTTACCGATATTA-3’。
3.一種權利要求1所述的遲緩愛德華氏菌表面展示型疫苗的應用，其特征在于：所述序列表SEQ?ID?No.1中的堿基序列所編碼的遲緩愛德華氏菌疫苗蛋白的疫苗菌株具有抑制遲緩愛德華氏菌的作用。
4.按權利要求3所述的遲緩愛德華氏菌表面展示型疫苗的應用，其特征在于：將所述序列表SEQ?ID?No.1中的堿基序列所編碼的遲緩愛德華氏菌疫苗蛋白的疫苗菌株經LB培養基培養至OD600為0.8-1后懸浮于PBS緩沖液中至終濃度為1x108cfu/ml，所得的疫苗制備液具有抑制遲緩愛德華氏菌的作用。
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