[發明專利]一種免疫檢測方法和裝置

無效

• 申請號: 201010549897.5
• 申請日: 2010-11-18
• 公開（公告）號: CN102095848A
• 公開（公告）日: 2011-06-15
• 發明（設計）人: 吳堅
• 申請（專利權）人: 杭州安遠科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/569;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種免疫檢測技術，尤其是采用阻抗陣列芯片同時進行多組分檢測，并利用微磁球進行信號放大，利用外磁場的作用清除吸附磁球以降低背景信號。

背景技術

酶聯免疫分析(ELISA)是一種常見的免疫方法，其利用一抗來實現被測目標的捕捉，同時利用偶聯有酶標的二抗來實現信號檢測。由于酶的催化放大作用，酶聯免疫可以實現較為靈敏的檢測，但是，酶是一生物物質，性能受很多因素影響，穩定性不是很好。同時，目前人們還主要通過一些光學的手段，如比色法、熒光法等對酶的催化底物或產物進行檢測。光學檢測雖然比較穩定，但是往往需要較為復雜的光學系統，從而使得檢測一般只能在實驗室中進行，限制了應用范圍。

電化學檢測通過電極在溶液中進行，其放大電路和信號調理也十分簡單，因此在簡化酶聯免疫檢測系統的研究中，是一種很有前途的技術。目前已經有很多利用電化學手段來進行免疫檢測的報道。例如，在最常見的辣根過氧化物酶(HRP)標記體系中，就有報道利用底物TMB在酶催化反應后的電化學活性的變化通過電化學方波法來進行檢測。也有些報道是利用鐵氰化鉀等電子傳遞劑來進行電化學酶聯免疫檢測。電化學檢測有很多種模式，在這之中，特別是溶液阻抗測量，不受電極表面各種情況的影響，十分穩定。

在免疫反應中，利用溶液阻抗進行測量，其主要缺點是檢測靈敏度較差。免疫反應只是在電極表面發生，也只能引起這附近溶液阻抗的變化，而實際所測試的是兩電極間所有溶液的阻抗。

發明內容

為了解決現有技術中的不足，本發明提供了一種可測量多種成分、測量靈敏度高的免疫檢測方法和裝置。

一種免疫檢測方法，包括以下步驟：

提供陣列，該陣列包括至少兩對微電極；

在所述陣列表面具有與被測成分對應的一抗抗體；

將被測物和微磁球加至所述陣列的表面并進行反應，所述微磁球上具有與一抗抗體對應的二抗抗體；

對所述陣列表面進行洗板處理；

向所述陣列表面加緩沖液，測量所述微電極之間的參數，通過分析所述參數，從而得到被測物中被測成分的含量。

作為優選，相鄰微電極的間距為1-1000微米。

作為優選，所述微磁球的直徑為微米或納米量級。

進一步，在所述微磁球加至陣列表面后，利用微磁球與其它元件間的力而使微磁球富集在陣列表面。

進一步，在洗板后，利用微磁球與其它元件間的力而吸走未反應的磁球。

作為優選，所述元件為磁鐵。

進一步，所述陣列固定相同或不同的一抗抗體。

進一步，所述被測物和磁球是同時加至陣列的表面。

進一步，先將被測物加至陣列的表面，再將磁球加至陣列的表面。

作為優選，采用磷酸緩沖液。

作為優選，所述參數為阻抗。

為了實現上述方法，本發明還提出了這樣一種免疫檢測裝置，所述檢測裝置包括：

陣列，該陣列包括至少兩對微電極；

與被測成分對應的一抗抗體；

微磁球，所述微磁球上具有與一抗抗體對應的二抗抗體；

用于對所述陣列表面進行洗板處理的模塊；

緩沖液；

用于測量所述微電極之間的參數的測量模塊；

分析模塊，用于分析所述參數而得到被測物中被測成分的含量。

作為優選，相鄰微電極的間距為1-1000微米。

作為優選，所述微磁球的大小為微米或納米量級。

進一步，所述免疫檢測裝置還包括磁鐵。

更進一步，所述微電極設置在陣列的正面，磁鐵設置在陣列的背面。

所述抗體是一種或多種。

作為優選，所述緩沖液采用磷酸。

作為優選，所述參數為阻抗。

本發明所采用的陣列由多個呈方形或矩形排列的電極組成，其相鄰電極的間距在1微米至1000微米。通過外接的信號檢測電路，每個電極可以和相鄰的電極配合組成一個電化學電池，也可以和其他電極配合組成一個電化學電池，從而可以根據實際需要進行靈活配置，達到最大的檢測靈敏度。

本發明總的技術構思為：在進行免疫測量前，首先需要根據實際測量的要求，在各個陣列表面固定上一抗抗體。針對被測溶液中的具體情況，電極陣列的不同區域可以固定上相同的抗體，也可以固定上不同的抗體。同時，將和所使用一抗抗體相對應的二抗抗體固定在微磁球上，所用微磁球的直徑根據實際需要，可以在納米直至微米量級。