[發(fā)明專利]一種制備固定化腺苷甲硫氨酸合成酶和腺苷甲硫氨酸的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010545201.1 | 申請日： | 2010-11-11 |
| 公開（公告）號： | CN101985616A | 公開（公告）日： | 2011-03-16 |
| 發(fā)明（設計）人： | 牛衛(wèi)寧;欽傳光;徐洪杰;曹珊珊;尚曉婭;徐春蘭 | 申請（專利權）人： | 西北工業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N11/02 | 分類號： | C12N11/02;C12P19/40 |
| 代理公司： | 西北工業(yè)大學專利中心 61204 | 代理人： | 王鮮凱 |
| 地址： | 710072 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 制備 固定 腺苷 甲硫氨酸 合成 方法 | ||
1.一種固定化腺苷甲硫氨酸合成酶的制備方法，其特征在于步驟如下：
步驟1：將氨基樹脂載體Seplite?LX-1000HA與1～5％的戊二醛溶液交聯(lián)2～10h；
步驟2：將步驟1經過戊二醛交聯(lián)的氨基樹脂載體與重組腺苷甲硫氨酸合成酶溶液在20～35℃下反應10～25h，得到固定化腺苷甲硫氨酸合成酶；所述重組腺苷甲硫氨酸合成酶與氨基樹脂載體Seplite?LX-1000HA的比例為5～40mg/g樹脂。
2.根據(jù)權利要求1所述的固定化腺苷甲硫氨酸合成酶的制備方法，其特征在于：所述重組腺苷甲硫氨酸合成酶是將來源于大腸桿菌的腺苷甲硫氨酸合成酶基因經大腸桿菌表達得到的腺苷甲硫氨酸合成酶。
3.根據(jù)權利要求1所述的固定化腺苷甲硫氨酸合成酶的制備方法，其特征在于：所述重組腺苷甲硫氨酸合成酶與氨基樹脂載體Seplite?LX-1000HA的比例為20mg/g樹脂。
4.一種利用權利要求1～3所述的任一種固定化腺苷甲硫氨酸合成酶生產腺苷甲硫氨酸的方法，其特征在于步驟如下：
步驟1：配制固定化腺苷甲硫氨酸合成酶催化生產腺苷甲硫氨酸的反應液，反應液組成如下：Tris?100mmol.L-1、三磷酸腺苷10～30mmol.L-1、DL-甲硫氨酸25～75mmol.L-1、氯化鉀100mmol.L-1、硫酸鎂20～60mmol.L-1和對甲基苯磺酸鈉400～800mmol.L-1，溶解后調pH值至6.0～8.0；
步驟2：固定化腺苷甲硫氨酸合成酶裝柱，在35℃下將反應液以1.0～4.0倍柱床體積/小時的流速過柱，收集流出液，得到腺苷甲硫氨酸溶液。
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