[發明專利]擴增紅球菌的PCR引物及檢測紅球菌的方法有效
| 申請號: | 201010538254.0 | 申請日: | 2010-11-09 |
| 公開(公告)號: | CN101967481A | 公開(公告)日: | 2011-02-09 |
| 發明(設計)人: | 梅海;陳功;郝純;李雪 | 申請(專利權)人: | 盎億泰地質微生物技術(北京)有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/11 | 分類號: | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人: | 馮瓊;李玉秋 |
| 地址: | 102200 北京市昌平區*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 擴增 球菌 pcr 引物 檢測 方法 | ||
1.一對擴增紅球菌DNA的PCR引物,其特征在于,其上游引物序列如SEQ?ID?No.1所示,下游引物序列如SEQ?ID?No.2所示。
2.一種檢測紅球菌的方法,包含以下步驟:
步驟1:按如下比例配制反應體系:
PCR?buffer:10μL
dNTP:4μL
上游引物:1μL
下游引物:1μL
樣品DNA:5μL
Taq:0.5μL
ddH2O:28.5μL
其中,樣品DNA濃度為100-200ng/μL,上游引物及下游引物濃度為10-20pmol/μL,所述上游引物序列如SEQ?ID?No.1所示,下游引物序列如SEQID?No.2所示;
步驟2:94℃預變性10分鐘進行30個PCR循環,循環完畢后72℃延伸10分鐘;
步驟3:瓊脂糖電泳檢測擴增結果。
3.根據權利要求2的方法,其特征在于,步驟2中所述PCR循環參數為:94℃變性1分鐘,51℃復性5秒,72℃延伸25秒。
4.根據權利要求2的方法,其特征在于,步驟3所述檢測為檢測440bp及200bp的條帶出現。
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