[發明專利]一種氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201010535013.0
• 申請日: 2010-11-08
• 公開（公告）號: CN102462846A
• 公開（公告）日: 2012-05-23
• 發明（設計）人: 黃容琴;蔣晨;柯偉倫
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/48;A61K47/34;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

1.一種氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物，其特征在于，由氯代毒素修飾的基因遞釋載體和治療基因質粒DNA構成，所述的氯代毒素修飾的基因遞釋載體由陽離子高分子材料、親水性聚合物和氯代毒素組成；其中，氯代毒素作為靶向頭基，陽離子高分子材料為基礎載體，通過親水性聚合物連接氯代毒素構筑形成基因遞釋載體，該基因遞釋載體與治療基因質粒DNA構筑成基因遞釋復合物；所述的親水性聚合物與陽離子高分子材料的分子比是1~20:1，氯代毒素與陽離子高分子材料的分子比為1~10:1，所述的陽離子高分子材料與治療基因質粒DNA的質量比是1~20:1。

2.按權利要求1所述的氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物，其特征在于，所述的復合物的尺寸為50～400?納米。

3.按權利要求1所述的氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物，其特征在于，所述的陽離子高分子材料選自聚酰胺-胺型樹狀分枝物、樹枝狀聚賴氨酸、殼聚糖、聚乙烯亞胺、聚賴氨酸、聚甲基丙烯酸、聚甲基丙稀酰胺、聚氨基酰胺或陽離子脂質。

4.按權利要求1所述的氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物，其特征在于，所述的親水性聚合物選自聚乙二醇、聚氧乙烯或聚-N-(2-羥丙基)-甲基丙稀酰胺。

5.按權利要求1所述的氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物，其特征在于，所述治療基因質粒DNA選自質粒pORF-TRAIL和腫瘤抑制基因P53、PTEN、P21或P16。

6.權利要求1所述的氯代毒素修飾的腦膠質瘤靶向基因遞釋復合物的制備方法，其特征在于，其包括步驟：將制備的陽離子高分子材料-親水性聚合物-氯代毒素基因遞釋載體溶于pH值7.3～7.5磷酸鹽緩沖液中配制成所需濃度的溶液，將治療基因質粒DNA溶于50?mM?硫酸鈉溶液中配制成所需濃度的溶液，室溫下兩者等體積漩渦30?s混勻制成基因遞釋復合物。

7.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的基因遞釋復合物為50～400?納米。

8.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的基因遞釋載體中，陽離子高分子材料、親水性聚合物和氯代毒素以共價方式連接。

9.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的基因遞釋載體通過下述步驟制備：

陽離子高分子材料和親水性聚合物以1:1~20的分子比溶于pH值7.8～8.2磷酸鹽緩沖液中，室溫攪拌反應60～180分鐘，兩種分子中含有的基團發生特異性反應，生成陽離子高分子材料-親水性聚合物，超濾法除去未反應的親水性聚合物并更換為pH值6.8～7.2磷酸鹽緩沖液；同時，氯代毒素與巰基化試劑反應后引入巰基，以1～10:1的分子比與陽離子高分子材料-親水性聚合物上的特異基團室溫攪拌反應12～36小時后生成陽離子高分子材料-親水性聚合物-氯代毒素，分子排阻色譜法除去未反應的氯代毒素。