[發明專利]一種獲得高純度棘白菌素D的方法

有效

• 申請號: 201010533876.4
• 申請日: 2010-11-05
• 公開（公告）號: CN102464703A
• 公開（公告）日: 2012-05-23
• 發明（設計）人: 胡海峰;閔濤玲;朱寶泉
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院
• 主分類號: C07K7/56
• 分類號: C07K7/56;C07K1/20
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 張睿

技術領域

本發明涉及化合物的純化方法，尤其涉及一種獲得高純度棘白菌素D的方法。

背景技術

棘白菌素類化合物是20世紀70年代發現的一類具有環狀六肽核心和脂肪酸側鏈結構天然環狀脂肽類化合物。根據環六肽上不同的取代基和脂肪酸側鏈分為不同的化合物。棘白菌素類化合物屬于一類新型抗真菌化合物，作為葡聚糖合成酶抑制劑，非競爭性地抑制真菌細胞壁的β-(1，3)-D-葡聚糖的合成而發揮殺菌作用。在發酵過程中會產生很多類似組分(美國專利4024245)。其中棘白菌素D具有與棘白菌素B類似的抑菌活性，因此具有開發價值(美國專利4024245、495878、495652)，然而在發酵過程中棘白菌素D的產量比棘白菌素B的低20-200倍，后續分離提取困難，成本較高。

棘白菌素B和棘白菌素D的結構

??化合物??R1??R2??R3??棘白菌素B??OH??OH??OH??棘白菌素D??H??H??H

棘白菌素D相關分離純化的報道很少，僅來自于禮來公司的相關專利中(4024245)有詳細報道，其工藝采用氯仿萃取、乙醚沉淀、硅膠柱層析方法分離純化棘白菌素D。通過這種方法獲得的棘白菌素D中含有色素等雜質(顏色為黃色或淡黃色)，純度約70％-90％左右，收率較低(40-60％)，且大量使用乙腈、氯仿有毒試劑，成本高，難以大規模應用。

因此，本領域迫切需要提供一種新的獲得高純度棘白菌素D的方法。

發明內容

本發明旨在提供一種高純度棘白菌素D的制備方法。

在本發明中，提供了一種高純度棘白菌素D的制備方法，所述的方法包括步驟：

(1)將含有棘白菌素D粗品的溶液和甲醇水溶液1混合，得到溶液1；

(2)將溶液1上樣至反相層析柱；和

(3)用甲醇水溶液2進行洗脫，得到高純度棘白菌素D。

在另一優選例中，以所述含有棘白菌素D粗品的溶液的總體積計，其中棘白菌素D粗品的含量為10-90w/L％；較佳地，棘白菌素D粗品的含量為70-90w/L％；更佳地，棘白菌素D粗品的含量為80-90w/L％。

在另一優選例中，以所述甲醇水溶液1的總體積計，其中甲醇的含量為30-65L/L％；較佳地，為50-60L/L％。

在另一優選例中，所述反相層析柱選自NM-PS?100、MCI、或C18。

在另一優選例中，以所述甲醇水溶液2的總體積計，其中甲醇的含量為60-90L/L％；較佳地，為82-87L/L％。

在另一優選例中，甲醇水溶液2中甲醇的含量比甲醇水溶液1中甲醇的含量高20-30L/L％。

在另一優選例中，所述的步驟(3)是用甲醇水溶液2進行洗脫，將得到的棘白菌素D的洗脫液蒸干溶于甲醇，加入少量水使其過飽和后結晶析出，得到高純度棘白菌素D。

據此，本發明提供了一種新的獲得高純度棘白菌素D的方法。

附圖說明

圖1是本發明實施例1純化得到的棘白菌素D的HPLC圖譜。

具體實施方式