[發明專利]多吡啶釕配合物[Ru(bpy)2(dppzi)]2+的應用和應用方法

無效

• 申請號: 201010533708.5
• 申請日: 2010-11-05
• 公開（公告）號: CN102465171A
• 公開（公告）日: 2012-05-23
• 發明（設計）人: 石碩;趙娟;姚天明
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 楊元焱

技術領域

本發明涉及金屬配合物，具體涉及一種多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的應用和應用方法。

背景技術

近年來，多吡啶釕配合物的研究十分活躍，這是因為這些配合物具有獨特的DNA結合能力、良好的激發態活性、抗腫瘤活性、剛性平面、熱力學穩定性好、光化學和光物理信息豐富等特性[1]。這些特性使得這類配合物在分子生物學、醫學、生物無機化學等諸多領域中具有重要的應用前景。尤其是在與DNA鍵合等方面，如DNA結構探針、DNA分子光開光、DNA足跡試劑、DNA斷裂試劑和抗癌藥物等方面具有十分重要的應用[2，3]。

20世紀三四十年代，Hermann?Muller和Barbara?McClintock同時提出了端粒的概念，它是染色體末端的一種特殊結鉤，能防止染色體DNA降解、末端融合、缺失及非正常重組，維持染色體的完整和穩定[3，4]。人類的端粒含有重復銜接的雙鏈DNA序列(5′-TTAGGG)：(5′-CCCTAA)。染色體富G的鏈能在K⁺、Na⁺等陽離子誘導下形成由堆積的四分體組成通過氫鍵穩定的G-quadruplex結構，同時，其互補的富C鏈能在酸性或中性條件下基于C-C⁺堿基對自組裝形成所謂的i-motif結構[5-10]。G-quadruplex被認為對體內端粒酶延長端粒具有負向調控作用，目前，G-quadruplex被認為是潛在的癌癥治療靶標。相比G-quadruplex，i-motif的歷史還比較短，其涉及人類端粒、著絲粒DNA和RNA插入等結構及發現一些蛋白質能與富C端粒DNA片段特異性結合能形成i-motif結構，分子內i-motif結構的生物重要性被證實。除了人類端粒G-quadruplex外，i-motif也被認為是對于癌癥化療以及基因轉錄調節極富吸引力的藥物靶標[11]。人類基因組草圖推動了探索特殊結構DNA的步伐。由于人類基因組中的大量G-quadruplex和i-motif結構被證實，接下來的目標是如何通過小分子識別G-quadruplex和i-motif結構[12]。盡管釕多吡啶配合物在對雙鏈DNA識別方面的研究比較多，但其與特殊結構DNA的作用情況的研究還比較少，尤其是對G-quadruplex和i-motif這兩種重要結構的識別方面鮮見報道。

發明內容

本發明的目的，就是為了提供一種多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺作為識別端粒DNA結構的分子識別試劑的應用和應用方法。

為了達到上述目的，本發明采用了以下技術方案：一種多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的應用，所述多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺具有如下(1)式所示的結構式：

[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺中的bpy代表聯吡啶，dppzi代表二吡啶[3，2-a：2’，3’-c]并吩嗪-11，12-咪唑；

所述的多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺用作識別端粒DNA的G-qaudruplex結構和i-motif結構的分子識別試劑。

所述的端粒DNA為人的端粒DNA。

所述的端粒DNA的G-qaudruplex結構使用的DNA的核苷酸個數為22個，核苷酸序列為5′-AGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG-3′。

所述的端粒DNA的i-motif結構使用的DNA的核苷酸個數為22個，核苷酸序列為5′-CCCTAACCCTAACCCTAACCCT-3′。

上述多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺的應用方法之一，是采用熒光滴定法識別端粒DNA的G-quadruplex結構和i-motif結構，該方法具體包括以下步驟：

1)將多吡啶釕配合物[Ru(bpy)₂(dppzi)]²⁺溶于PH＝5.5的緩沖溶液，配制成濃度為5uM的配合物溶液；

2)取上述配合物溶液置于樣品池中，用450nm可見光激發，觀察發光情況；