[發明專利]一種采用相轉移酶催化技術發酵生產茶黃素的方法

無效

• 申請號: 201010520688.8
• 申請日: 2010-10-27
• 公開（公告）號: CN101979632A
• 公開（公告）日: 2011-02-23
• 發明（設計）人: 楊衛國;周櫻;楊月芬
• 申請（專利權）人: 南通邁特生物工程有限公司
• 主分類號: C12P17/16
• 分類號: C12P17/16
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

技術領域

本發明涉及一種采用相轉移酶催化技術發酵生產茶黃素的方法，屬于食品添加劑技術領域。

背景技術

目前，茶多酚已經成為大宗植物提取物品種，以其為原料，采用體外酶促氧化制取茶黃素，是利用多酚氧化酶POP的氧化特型，定向氧化茶多酚生產茶黃素的方法。茶黃素具有抗癌、抗心腦血管疾病、抑菌抗病毒等多種活性，在天然藥物、功能性食品及功能飲料領域有著廣闊的應用前景。公開號為CN1626668A的技術，采用鮮茶葉搗碎成渣和汁，加入市場購買的酶后，加到茶多酚與有機溶劑的混合溶液中，再加入酸水溶液，攪拌通風反應，酶促發酵生產茶黃素。但該技術添加成品茶多酚作為發酵原料，成本較高，發酵液含有大量水容易乳化，分離困難。公開號為CN1403580A的技術，采用將多酚氧化酶用包埋材料進行固定化，在一定的反應條件下，使高純度的茶多酚氧化聚合成高純度的茶黃素。該技術的酶固定化包埋程序操作繁雜，成本較高，而且酶的純化過程會造成一定的環境污染。

發明內容

本發明的目的在于克服上述不足之處，直接采用提取茶多酚的干茶末為原料，利用鮮茶葉中的天然多酚氧化酶，用相轉移酶催化發酵技術直接制備茶黃素，提供一種低能耗低污染，操作簡便的生產茶黃素的方法，生產過程不產生工藝污水，設備投資簡單生產成本低。

為了達到上述目的，本發明提供了一種采用相轉移酶催化技術發酵生產茶黃素的方法，其特征在于，具體步驟為：

第一步：將鮮茶葉用轉子揉切機攪切粉碎成鮮茶葉渣作為天然酶粉，備用；

第二步：取原料茶葉1重量份，加入聚乙二醇或丙三醇水溶液1~2重量份、第一步制備的天然酶粉0.7～7.0重量份以及乙酸乙酯10～15重量份，得到相轉移酶促體系；

第三步：攪拌條件下，向第二步得到的相轉移酶促體系中鼓入空氣或氧氣，室溫下通氣攪拌2~3小時，得到茶黃素反應液，過濾出1次反應液，在濾渣中再加入5~10重量份的乙酸乙酯，室溫下通氣攪拌2小時，得到2次反應液，分離過濾出2次反應液，在濾渣中再加入5~10重量份乙酸乙酯，室溫下通氣攪拌2小時，得到3次反應液，分離過濾出3次反應液；

第四步：合并上述1-3次反應液，減壓濃縮得到濃縮液，加入1~2重量份的水，減壓蒸除乙酸乙酯，抽濾或離心濾除析出的葉綠素；

第五步：將第四步中除去葉綠素的茶黃素水溶液減壓濃縮干燥或噴霧干燥，得粉末狀茶黃素產品。

所述的第一步中的鮮茶葉優選為天然大葉種茶鮮葉。

所述第二步中的相轉移劑優選為聚乙二醇水溶液或丙三醇水溶液。

所述第二步的原料茶葉為綠茶生產加工中產生的邊角料或綠茶老茶。

本發明的有益效果是：?本發明工藝簡單、能耗低、無污染，采用制取茶多酚的干茶末為原料，鮮茶葉作為酶源，一步法催化干茶末中的茶多酚生成茶黃素，即可降低直接生產成本，又可降低環保處理成本壓力。本發明旨在形成一種相轉移酶催化系統，即原料茶末和天然酶粉吸附相轉移劑后，在原料茶葉和天然酶粉表面形成固相-水相-酯相的微系統，茶多酚由原料茶葉的固相擴散至水相，再擴散至酯相中，然后擴散至天然酶粉表面的水相中，被水相中溶解的多酚氧化酶系催化聚合生成茶黃素，茶黃素再被酯相萃取，避免了酶粉中的酶系被反應產物毒化失去催化作用。本方法所得茶黃素純度40%以上，殘留物以未氧化的茶多酚為主，產品可以在食品飲料商廣泛應用，或進行進一步精制，得到用于醫藥的茶黃素產品。本方法茶黃素的得率為干茶葉重量的10%~15%，以茶葉中的茶多酚含量計，催化收率高達50%以上。

具體實施方式

下面結合實施例來具體說明本發明。

實施例1

取大葉種綠茶鮮葉2公斤，用轉子揉切機攪切粉碎，依次加入干綠茶末2公斤、聚乙二醇的10%（W/W）水溶液2公斤、提取劑乙酸乙酯20公斤，在室溫下鼓空氣條件下混合攪拌3小時，用絹布過濾出一次發酵液。再加入乙酸乙酯16公斤，在室溫鼓空氣條件下混合攪拌2小時，用絹布過濾出二次發酵液。再加入乙酸乙酯15公斤，在室溫下鼓空氣條件下混合攪拌2小時，用絹布過濾出三次發酵液。合并發酵液，減壓濃縮近干，加入2公斤水，減壓蒸除乙酸乙酯，離心除去析出的葉綠素。除去葉綠素的茶黃素溶液真空干燥，干燥條件為50℃，真空度大于-0.06MPa，得到206克粉末狀產品，茶黃素含量41.2%。

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