[發明專利]大腸桿菌TolC抗原及其抗體與應用

無效

• 申請號: 201010513226.3
• 申請日: 2010-10-12
• 公開（公告）號: CN101974072A
• 公開（公告）日: 2011-02-16
• 發明（設計）人: 彭宣憲;李惠
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K14/795;C07K16/12;C07K16/06;C12N15/31;A61K39/40;A61P31/04
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種抗大腸桿菌TolC片段的抗體。

背景技術

近年來細菌耐藥日趨嚴峻，成為醫藥界倍受關注的問題。由于抗生素濫用造成細菌耐藥性問題尤為突出。我國臨床分離的一些細菌對某些藥物的耐藥性已居世界首位。除耐青霉素的肺炎鏈球菌、耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌、腸球菌、真菌等多種耐藥菌外，進入我國僅20多年的喹諾酮類抗生素的耐藥率已經達60％-70％。據報道，包括廣州在內的國內一些大城市人群感染的金黃色葡萄球菌中，80％已經產生了對青霉素G的耐藥性。凱福隆、頭孢三嗪等第三代的頭孢類菌抗生素的應用已日趨普遍，抗生素品種的選用明顯超前。抗生素的濫用主要是由于抗生素生產和銷售管理薄弱、臨床的誤用和濫用、以及將抗生素作為生長促進劑在動物養殖中廣泛使用所導致。由于在抗生素使用與病原菌耐藥水平之間存在著一種宏觀的量化關系，即一定范圍內的抗生素使用可以導致病原菌整體耐藥水平以及耐藥菌感染率的變化。由此，人和動物的腸道正常菌群暴露于抗生素而普遍產生耐藥性，并通過糞便直接污染環境、水、食品，導致耐藥菌不斷增加，也使人體接觸耐藥菌的機會不斷增加。因此耐藥菌的種類非常廣泛。這樣一來，人體如果再獲得耐藥菌的感染治療起來就比較困難。因此，控制目前已經廣泛存在的耐藥菌已成為一個重要的社會和科學問題。

耐藥菌的防制尚不能完全寄托在新抗生素的發現和發明，因為抗生素的生產與發展伴隨著細菌耐藥性的不斷發展，一種新的抗生素投入使用后，很快就發現有相應的抗性菌株出現。在細菌中普遍存在的抗藥性是對抗菌藥物的生產開發及對細菌性疾病防治的一個巨大挑戰，直接危害食品安全和人類健康。對細菌耐藥機理的深入研究，發現其作用靶點是解決這一難題的關鍵。

業已報道，大腸桿菌外膜蛋白TolC是耐藥關鍵蛋白，是AcrAB-TolC藥物外排系統中重要組成組分。我們先前證明，采用抗TolC可以負調TolC的耐藥作用，起到靶向抑制耐藥菌生長的目的，但其作用的靶序列不清楚。我們先前采用的抗TolC的抗體，是針對整個TolC蛋白。根據生物信息分析，整個TolC蛋白具有線性B細胞表位27個，此外還有非線性B細胞表位。由于每個表位均能夠刺激機體產生免疫應答，故針對整個TolC蛋白至少可以產生27個各自表位特異性的抗體。由于各表位氨基酸序列不同，其生物學功能亦具有差異，抗體作用后產生的效應亦存在差異。此外，抗體也存在一定的交叉反應，可以跨物種進行反應，即所謂的抗體異嗜性現象。因此，采用針對整個蛋白的特異性抗體，具有靶序列特異性不明確、副反應不清楚的不足，不利于其有關成藥特性的研究。

發明內容

本發明的目的是在于針對現有技術的不足，提供一種針對TolC耐藥關鍵結構域的抗體，以克服目前的抗體具有靶序列特異性不明確、副反應不清楚的的缺陷，提高抗體的有效性和安全性。

本發明通過以下技術方案實現上述目的：

發明提供了一種大腸桿菌(E.coli)TolC抗原，包括如SEQ?ID?NO：1(SEQ?ID?NO：1：SNGYRDANGI)所示的序列。

本發明也提供了一種抗原，由上述大腸桿菌TolC抗原與血藍蛋白偶連。)

同時發明保護了編碼如權利要求1所述大腸桿菌TolC抗原的基因片段，具有SEQ?ID?NO：2所示的序列。SEQ?ID?NO：2：agca?acggctaccg?cgacgcgaac?ggcatc。