[發明專利]牛樟芝抗癌活性物質、制備方法及其用途

有效

• 申請號: 201010502077.0
• 申請日: 2010-09-30
• 公開（公告）號: CN102443613A
• 公開（公告）日: 2012-05-09
• 發明（設計）人: 蔣丙煌;林育蔚
• 申請（專利權）人: 蔣丙煌
• 主分類號: C12P17/04
• 分類號: C12P17/04;C12P1/02;A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;曾旻輝

1.一種牛樟芝抗癌活性物質，是將牛樟芝菌絲體經過下列步驟所產生者：

步驟1：將牛樟芝菌絲體以液體酸酵培養；

步驟2：將步驟1所得菌絲體經過乙醇萃取，得到乙醇萃取物；

步驟3：將步驟2所得乙醇萃取物濃縮后溶于水中，并加入等體積的乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯萃取物；

步驟4：將步驟3所得乙酸乙酯萃取物以膠體管柱層析純化，并以正己烷/乙酸乙酯梯度流洗液為流洗液，以80％正己烷/20％乙酸乙酯至70％正己烷/30％乙酸乙酯流洗可得到片段f、以70％正己烷/30％乙酸乙酯到60％正己烷/40％乙酸乙酯流洗可得到片段g；

步驟5：將步驟4所得流洗液片段g以膠體管柱層析純化，并以正己烷/乙酸乙酯梯度流洗液，以取得流洗液片段E、F、G、H、I；其中片段E為80％/20％正己烷/乙酸乙酯至75％/25％正己烷/乙酸乙酯流洗所得到，片段F、G為75％/25％正己烷/乙酸乙酯流洗依序分別所得到，片段H為75％/25％正己烷/乙酸乙酯至70％/30％正己烷/乙酸乙酯流洗所得到，片段I為70％/30％正己烷/乙酸乙酯流洗所得到；以及

步驟6：將步驟5所得的流洗液片段E、F、G、H、I，以膠體管柱層析純化出4-安卓奎諾爾B；

其中該乙酸乙酯萃取物、流洗液片段f、流洗液片段g、流洗液片段E、F、G、H、I及4-安卓奎諾爾B，即為牛樟芝抗癌活性物質。

2.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述菌絲體為寄存于財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心的牛樟芝BCRC35716。

3.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述液體酸酵培養步驟為：在含有2％葡萄糖與2％麥芽萃取物的發酵培養液內，以20～25℃、槽壓0.5～1vvm、20～100rpm攪拌速率條件下培養。

4.如權利要求3所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述發酵液的pH值為4.5～5.5。

5.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述乙醇萃取步驟為：將牛樟芝菌絲體干燥后，以90～99％乙醇與該菌絲體混合，以均質機混合之。

6.如權利要求5所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述牛樟芝菌絲體與乙醇的比例為1∶10～1∶50(g/ml)。

7.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述步驟4所用的膠體管柱為硅膠管柱，230-400篩孔，750-75mm。

8.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述步驟5所用的膠體管柱為硅膠管柱，230-400篩孔，420-25mm。

9.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述于步驟6的膠體管柱層析所用的膠體管柱為硅膠管柱Luna?5u?Silica(2)100A?column(4.6×250nm)，且其所用的流洗液為正己烷/乙酸乙酯混合液，其比例為80∶20。

10.如權利要求1所述的牛樟芝抗癌活性物質，其特征是，所述抗癌活性物質是可抑制肝癌細胞、大腸癌細胞及攝護腺癌細胞的增殖。

11.一種抗癌組成物，其特征是，包含有權利要求1所述的有效量牛樟芝抗癌活性物質，以及適當的稀釋劑、賦形劑或載體。

12.如權利要求11所述的抗癌組成物，其特征是，所述抗癌活性物質是可抑制肝癌細胞、大腸癌細胞及攝護腺癌細胞的增殖。

13.一種4-安卓奎諾爾B的用途，其是用于制備抗癌的藥物。

14.如權利要求13所述的用途，其特征是，所述4-安卓奎諾爾B具有下列化學結構：

15.如權利要求13所述的用途，其特征是，所述抗癌的藥物是可抑制肝癌細胞、大腸癌細胞及攝護腺癌細胞的增殖。