[發明專利]檸檬苦素的制備方法及組合物和其應用

有效

• 申請號: 201010300601.6
• 申請日: 2010-01-22
• 公開（公告）號: CN101781355A
• 公開（公告）日: 2010-07-21
• 發明（設計）人: 張登科
• 申請（專利權）人: 張登科
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00;A61K31/585;A61P35/00
• 代理公司: 西安智邦專利商標代理有限公司 61211
• 代理人: 商宇科

技術領域

本發明屬于植物藥(中草藥)領域，具體而言，本發明涉及一種高純度的檸檬苦素的制備方法，以及以其制備出的高安全性的含高純度檸檬苦素的藥物組合物。另外，本發明還涉及上述藥物組合物在制備用于預防和/或治療結腸癌或直腸癌的藥物中的應用。?

背景技術

檸檬苦素(limomin)，又稱吳萸苦素、白蘚內酯、黃柏內酯，主要存在于蕓香科(Rutaceae)和楝科(Meliaceae)植物中，如枳實(臍橙、柑桔、香橙)柚等中，以果核(種子)中含量較高，果皮中含量較少(約萬分之一至十萬分之五)。檸檬苦素的化學結構如下所示：?

檸檬苦素具有抗癌、鎮痛、抗炎、降低膽固醇、抑制HIV-1病毒、催眠、抗焦慮、鎮靜和增加食欲改善消化功能等作用，還有殺蟲作用，有明顯抗瘧(原蟲)作用。?

當前，檸檬苦素的制備方法已經有現有文獻報道了，但是要么制備中浪費溶劑、提取率低，造成生產成本高；要么制備出的組合物(產物)純度低，帶有較多雜質，直接使用為用藥安全帶來極大隱患，而且也難以通過審批從而用于實際產業化，而進一步提純則相當于增加制備成本。?

具體而言，中國專利申請第00106285號公開了從蕓香科果實中提取檸檬苦素的方法，然而該方法制備的檸檬苦素的純度很低(達不到90％)；?

中國專利申請第00130622號公開了一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質的工藝，然而該工藝制備的檸檬苦素的純度很低，我們研究發現，要得到高純度產物需要在過硅膠色譜柱?后頻繁采用重結晶步驟(遠大于2次)才行，提取率低而且成本很高；?

中國專利申請第02145371號公開了檸檬苦素制備治療痔瘡藥物的用途，其安全性是口服標準，比本發明的產物能用于安全注射的標準低得多；?

中國專利申請第03118175號公開了一種從柚子中同時提取果膠、柚皮甙等八種產物的方法，然而該方法在通過吸附樹脂脫苦的時候將損失大量檸檬苦素，造成檸檬苦素的提取率低，另外三次用柱分離，造成工藝復雜，不適合工業化；?

中國專利申請第03140079號公開了一種檸檬苦素化合物-木果楝內酯及其用途，其涉及新的化合物；?

中國專利申請第200780038818號公開了用于激活PLTP基因表達的方法和組合物，其包括施用有效量的檸檬苦素類化合物，該方法和組合物用于治療肥胖；?

中國專利申請第200810037312號公開了一種工業層析法制備檸檬苦素單體的工藝，該文獻將工業層析柱用在結晶后與重結晶前，檸檬苦素損失較大，而且我們研究發現，雖然該文獻聲稱(而且沒有提供依據證明)產物中的檸檬苦素純度大于98％、99％，但是我們重復了其實施例，發現純度最好也不超過93％，達不到注射用的安全純度，如要提高純度，需要再增加多次重結晶過程；?

中國專利申請第200810046164號公開了從吳茱萸中分離檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿的方法，然而其中需要用到高效制備液相分離，不適用工業生產(或者工業生產成本極高)，只適合實驗室制備；?

中國專利申請第200810204440號公開了一種從柚核中提取檸檬苦素的工藝，然而該工藝所得的產物純度不超過92％；?

趙雪梅等在“柑橘屬中檸檬素類化合物研究進展”一文中提到檸檬苦素的提取制備，采用己烷脫脂、二氯甲烷提取，最后采用二氯甲烷多次重結晶得到檸檬苦素。該方法采用昂貴的己烷進行脫脂，成本高，而且提取率也低。?

為了克服現有技術的不足，本發明人經過長期艱苦研究，發現采用有機酸提取的效率比傳統的乙醇提取效率更高，而且采用有機酸提取-大孔樹脂純化-活性炭純化這三個步驟的依次組合就能夠在只需要兩次重結晶純化的情況下得到純度大于98％的檸檬苦素，生產成本低且產率高，而且最后的結晶純化無需氯仿等有毒物質。?

另外，當前中藥提取物的安全性問題，尤其是注射液安全性問題日益為廣大群眾和政府管理部門所重視，例如雙黃蓮注射液、清開靈注射液都由于制備殘留的雜質而發生了嚴重的不良反應，為此本發明人特別研究了本發明制備方法所得產物并進行了艱苦的動物實驗，令?人意外的是，其中的這些雜質即使在注射給藥時也沒有引起不良反應，而且也沒有干擾檸檬苦素藥效的發揮，能夠有效地預防和治療直、結腸癌，也可以用于直、結腸癌的輔助用藥。?

發明內容