[發(fā)明專利]不同類型食用菌新品種選育篩選方法的建立

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010300544.1
• 申請日: 2010-01-21
• 公開（公告）號: CN101760505A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫淑靜;胡開輝;徐建中;林胤煌;張俊蘭
• 申請（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊

1.一種不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：以苯胺藍(lán)為原料之一配制固體培養(yǎng)基，將不同類型食用菌融合后的菌種接種在所述固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基的變色情況，篩選鑒定該菌株是否為：類型1即含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種酶的菌株；

或者類型2含有錳過氧化物酶和木質(zhì)素過氧化物酶兩種酶的菌株；

或者類型3本身不含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種或兩種酶的菌株與本身含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種或兩種酶的菌株融合后的新品種，該新品種為含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種或兩種酶的菌株；

或者類型4本身不含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種或兩種酶的菌株與本身含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種或兩種酶的菌株融合后的新品種，該新品種為不含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶中一種或兩種酶的菌株。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：觀察苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基的變色情況，當(dāng)所述固體培養(yǎng)基的顏色由原來的藍(lán)色變成黃色時(shí)，鑒定出培養(yǎng)的食用菌中含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶或兩種酶均有；當(dāng)所述固體培養(yǎng)基的顏色為原來的藍(lán)色沒有發(fā)生變化時(shí)，鑒定出培養(yǎng)的食用菌中不含有錳過氧化物酶和木質(zhì)素過氧化物酶。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：所述方法適用于各種食用菌。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：所述方法適用于定性篩選和鑒定兩種不同類型的木腐菌或其他真菌的融合新菌株。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：具體步驟包括：

(1)配制苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基：酵母膏10g，葡萄糖10g，苯胺藍(lán)0.1g，瓊脂18-20g，pH自然，自來水定容到1000mL，在121℃下進(jìn)行高壓滅菌20分鐘；

(2)將苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基在微波爐中加熱，待溶解后放于超凈工作臺(tái)中，待溫度冷卻到45℃后倒平板；

(3)待平板凝固后，將活化7天后的食用菌的菌種接種到PDA固體培養(yǎng)基平板上進(jìn)行培養(yǎng)，然后將長滿PDA固體培養(yǎng)基平板上的菌種用1cm的打孔器取一個(gè)直徑1cm的圓形菌體放在步驟(2)已經(jīng)凝固好的苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基平板上，用封口膜封好后放在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10天，觀察其對苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基平板的變色作用，10天后進(jìn)行苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基平板的變色情況對比，定性鑒定出該食用菌是否含有錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶的食用菌。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：步驟(3)中對接種菌株后的苯胺藍(lán)固體培養(yǎng)基平板進(jìn)行觀察，以變色圈顏色的深淺來衡量菌對苯胺藍(lán)染料的脫色能力，每天記錄各個(gè)菌種菌絲圈的直徑和變色圈的直徑大小，并拍照；根據(jù)變色圈顏色的深淺初步定性的判斷菌株中錳過氧化物酶或木質(zhì)素過氧化物酶的活性大小。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：所述食用菌的菌種活化7天的培養(yǎng)步驟為：

(1)配制PDA固體斜面培養(yǎng)基：土豆200g，葡萄糖20g，pH自然，定容到1000ml，再分裝到18*180規(guī)格的試管中，每支裝5ml；

(2)將分裝好的試管培養(yǎng)基在121℃、高壓滅菌20分鐘；

(3)待滅菌鍋壓強(qiáng)降到Opa時(shí)，打開鍋將試管培養(yǎng)基進(jìn)行擺斜面，斜面高度不能超過試管的三分之二；

(4)將冰箱中的食用菌菌種取出和PDA斜面一起放在超凈工作臺(tái)中紫外滅菌20分鐘后進(jìn)行接種，接種時(shí)用接種鏟鏟取一塊菌塊放在斜面上即可；

(5)接種完成后，將接種好的斜面放在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天即可。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的不同類型食用菌新品種篩選鑒定的新方法，其特征在于：所述步驟(3)的活化后的食用菌的菌種接種到平板上為：將活化好的試管斜面菌種用接種鏟鏟取一小塊菌種放在已經(jīng)凝固好的PDA固體培養(yǎng)基平板上，用封口膜封好后放在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天后待用。