[發(fā)明專利]一種納米核酸導(dǎo)向藥物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010298594.0
• 申請日: 2010-09-30
• 公開（公告）號: CN102000346A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李相魯;趙念璽;張嚴(yán)冬;鄒水洋
• 申請（專利權(quán)）人: 東莞市麥亙生物科技有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/48;A61P35/00;A61P1/16;A61P11/00
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域；更具體地，本發(fā)明涉及一種納米核酸導(dǎo)向藥物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來，分子靶向藥物在腫瘤治療中顯示出其價(jià)值。本領(lǐng)域中，把針對細(xì)胞受體、基因、調(diào)控分子等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)為靶點(diǎn)的治療，稱為“靶向治療”。

靶向治療是腫瘤治療的趨勢，其毒副作用低于細(xì)胞毒性藥物，所以盡管目前靶向藥物療效不甚明顯，但也已經(jīng)為腫瘤患者帶來希望，為腫瘤治療提供了新的思路與方法。

許多核酸藥物目前在臨床應(yīng)用上最大的難題就是在體內(nèi)易于被降解的問題，難以到達(dá)靶點(diǎn)部位，這是本領(lǐng)域難以克服的技術(shù)難題，大大限制了其臨床應(yīng)用。例如，大量的研究已經(jīng)證明microRNA可以誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡，抑制癌細(xì)胞的生長，分裂。并且，microRNA是一種100％人源性的RNA，不會產(chǎn)生免疫反應(yīng)，安全性好。然而，microRNA在進(jìn)入到體內(nèi)后易于被降解，大大降低了其臨床應(yīng)用效果。

目前，核酸藥物治療癌癥大都處在研究階段，單純的寡核苷酸進(jìn)入人體內(nèi)，在很短的時間(幾分鐘至十幾分鐘就被體內(nèi)血液核酸酶完全分解，無法有效到達(dá)病灶，由于分子量小，并且容易隨經(jīng)腎臟尿液排出，非特異性藥物代謝，大大限制了核酸藥物的效果。

C32是一種體內(nèi)輸送基因的聚合體，其顆粒大小在納米級，毒副作用小。其可通過一種叫做內(nèi)吞作用的過程進(jìn)入細(xì)胞。然而，其在進(jìn)入到體內(nèi)后，受到體內(nèi)環(huán)境的影響，易于發(fā)生膨脹，從而在未到達(dá)給藥靶點(diǎn)前就釋放出其包裹的藥物。

因此，本領(lǐng)域迫切需要解決核酸藥物的高效給藥問題，使得藥物盡可能多地到達(dá)需要用藥的部位，不被體內(nèi)其它機(jī)制降解。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種納米核酸導(dǎo)向藥物及其制備方法和應(yīng)用。

在本發(fā)明的第一方面，提供一種納米核酸導(dǎo)向藥物，所述藥物是C32粒子、導(dǎo)向物、核酸藥物的復(fù)合物；

所述的復(fù)合物的表面修飾有聚乙二醇。

在一個優(yōu)選例中，所述的聚乙二醇結(jié)合于復(fù)合物表面的氨基基團(tuán)上。

在另一優(yōu)選例中，所述的導(dǎo)向物是特異性靶向藥物作用位點(diǎn)(如哺乳動物的組織、器官或細(xì)胞)的核酸或多肽。

在另一優(yōu)選例中，所述的多肽選自：SEQ?ID?NO：11-14中的一種或幾種。

在另一優(yōu)選例中，所述的核酸藥物是干擾分子。

在另一優(yōu)選例中，所述的干擾分子選自：SEQ?ID?NO：1-10的寡核苷酸中的一種或幾種。

在另一優(yōu)選例中，所述的干擾分子是SEQ?ID?NO：1-10的寡核苷酸的混合物；更佳地，是SEQ?ID?NO：1-10的寡核苷酸等比例的混合物。

在另一優(yōu)選例中，所述的納米核酸導(dǎo)向藥物是治療肝癌的藥物。

在另一優(yōu)選例中，所述的納米核酸導(dǎo)向藥物的粒徑的平均值約170±20納米。

在本發(fā)明的另一方面，提供一種制備納米核酸導(dǎo)向藥物的方法，所述方法包括：

(1)將C32粒子、導(dǎo)向物、核酸藥物混合，形成復(fù)合物；

(2)將(1)獲得的復(fù)合物進(jìn)行聚乙二醇修飾，獲得納米核酸導(dǎo)向藥物。

在另一優(yōu)選例中，所述的導(dǎo)向物是多肽，且步驟(1)包括：

(a)將C32與導(dǎo)向物進(jìn)行酯化反應(yīng)，形成C32-導(dǎo)向物復(fù)合物；以及

(b)將C32-導(dǎo)向物復(fù)合物與核酸藥物混合，形成C32-導(dǎo)向物-核酸藥物復(fù)合物。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，C32與導(dǎo)向物的摩爾比是1∶(2-3)；較佳地是1∶2.4。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，酯化反應(yīng)的催化劑是SO₄^2-/SiO₂。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，酯化反應(yīng)的時間是4±2小時；較佳地是4±1小時。

在另一優(yōu)選例中，聚乙二醇修飾的方法是：將C32-導(dǎo)向物-miRNA(較佳地溶于碳酸鈉溶液)與過量的mPEG-SPA(較佳地溶于乙腈中)反應(yīng)。

在本發(fā)明的另一方面，提供所述的納米核酸導(dǎo)向藥物的用途，用于制備靶向治療疾病的組合物。

在本發(fā)明的另一方面，提供一種組合物，含有：

有效量的所述的納米核酸導(dǎo)向藥物；以及

藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。

附圖說明

圖1顯示了利用透射電鏡(TEM)對獲得的藥物的結(jié)構(gòu)及大小進(jìn)行鑒定。右圖是對顆粒粒徑的統(tǒng)計(jì)分析。