[發(fā)明專(zhuān)利]一種新的短短芽孢桿菌菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010296437.6
• 申請(qǐng)日: 2010-09-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101955902A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-01-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 車(chē)建美;劉波;鄭雪芳;林抗美;唐建陽(yáng);朱育菁
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物資源研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;A23B7/155;C12R1/01
• 代理公司: 福州市鼓樓區(qū)京華專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 35212
• 代理人: 翁素華

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及一種微生物及其應(yīng)用，尤其涉及一種新的短短芽孢桿菌菌株及應(yīng)用其制備龍眼微生物保鮮菌劑。

【背景技術(shù)】

目前我國(guó)經(jīng)過(guò)保鮮貯藏的果蔬比例較小，由于保鮮處理不好，致使果品每年損耗率在20％至25％，蔬菜每年的損耗率達(dá)30％，果蔬每年的損耗量上億噸。如果利用好保鮮技術(shù)、保鮮材料以及相應(yīng)的設(shè)施，增加的收入是相當(dāng)驚人的，有關(guān)統(tǒng)計(jì)資料顯示，如果使我國(guó)果蔬損耗率降低3％至5％，全國(guó)每年可減少果品損耗200萬(wàn)噸，減少蔬菜損耗1000多萬(wàn)噸；如果貯藏保鮮量占到總產(chǎn)量的15％至20％，年貯藏保鮮量為6000萬(wàn)噸到8000萬(wàn)噸，按每公斤貯藏以0.2元計(jì)算，全國(guó)的果蔬產(chǎn)值可增加120億元至160億元。

當(dāng)前的水果保鮮主要借助于使用化學(xué)和物理方法進(jìn)行控制，然而，許多化學(xué)保鮮劑如亞硝酸鈉、苯甲酸鈉及SO₂等會(huì)殘留在貯藏的水果中，危害人體健康，而許多物理方法由于受到設(shè)備條件、操作技術(shù)等限制而無(wú)法得到應(yīng)用。微生物是廣泛分布于自然界的生物類(lèi)群，由于種類(lèi)豐富、代謝途徑多樣，能產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，對(duì)各種動(dòng)植物的生理、生化代謝具有重要的影響，有些微生物對(duì)各種病原微生物有著較強(qiáng)的拮抗作用。因此，將微生物應(yīng)用于龍眼水果的保鮮，有著巨大的潛力，Gutter于1953年首次報(bào)道了枯草芽孢桿菌對(duì)柑桔果實(shí)采后病原菌有拮抗作用，目前美國(guó)等已將2種防治水果采后病害的拮抗生物登記注冊(cè)(Huang，1995)，但未見(jiàn)將短短芽孢桿菌作為生產(chǎn)龍眼微生物保鮮菌劑的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種新的短短芽孢桿菌菌株FJAT-0809-GLX(Brevibacillus?brevis?FJAT-0809-GLX)，該短短芽孢桿菌菌株FJAT-0809-GLX于2010年08月27日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏編號(hào)為CGMCC?No.4115，且采用該新菌株的發(fā)酵液獲得一種能夠?qū)堁圻M(jìn)行保鮮的微生物保鮮菌劑。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問(wèn)題的：

本實(shí)驗(yàn)室從福建省永泰縣的西瓜根際土壤中分離并篩選得到具有拮抗作用的菌株，并將該菌株送至中國(guó)科學(xué)院微生物研究所對(duì)其理化特性等進(jìn)行鑒定，最終鑒定其為短芽孢桿菌菌屬的一個(gè)菌株。

進(jìn)一步地，采用該新菌株的發(fā)酵液制備一種能夠?qū)堁圻M(jìn)行保鮮的微生物保鮮菌劑，其制備方法的具體步驟為：

(1)菌株的活化：用接種環(huán)將短短芽孢桿菌菌株FJAT-0809-GLX劃線于菌株培養(yǎng)基上，并于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，并且培養(yǎng)溫度為30℃；

(2)制備種子液：將步驟(1)所獲得的短短芽孢桿菌菌株FJAT-0809-GLX的單菌落接種于100ml的種子培養(yǎng)基中，并將其置于恒溫振蕩搖床中培養(yǎng)24h，溫度30℃，轉(zhuǎn)速180rpm/min；

(3)制備液體發(fā)酵液：按10％移種量將步驟(2)所獲得的種子液轉(zhuǎn)入已滅菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，溫度30℃，轉(zhuǎn)速180rpm/min，并在培養(yǎng)過(guò)程中每隔一段時(shí)間取適量的發(fā)酵液檢測(cè)其PH值及孢子數(shù)量，當(dāng)其孢子數(shù)達(dá)到10×10⁸/mL時(shí)則獲得所需的液體發(fā)酵液；

(4)保鮮菌劑的制備：把NaCl和瓊脂粉按照10∶1的質(zhì)量配比混合后高壓滅菌，待溫度冷卻到40-50℃時(shí)，將步驟(3)所獲得的液體發(fā)酵液與該混合液以4∶1的比例混勻即可獲得所述龍眼微生物保鮮菌劑。

進(jìn)一步地，所述菌株培養(yǎng)基的組分：牛肉浸膏0.3％，蛋白胨0.5％，葡萄糖1％，瓊脂粉1.7％，蒸餾水配制，pH7.0；

所述種子培養(yǎng)基的組分：淀粉1％，牛肉浸膏0.5％，蛋白胨0.3％，蔗糖1％，酵母粉0.5％，CaCl₂0.5％，蒸餾水配制，pH7.0；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組分：淀粉0.8％，豆餅粉3％，蛋白胨0.2％，蔗糖2％，CaCl₂0.5％，消泡劑0.17％，蒸餾水配制，pH7.0。

本發(fā)明的有益效果在于：提供了一種新的短短芽孢桿菌菌株FJAT-0809-GLX，并且采用該短短芽孢桿菌菌株發(fā)酵液制備能夠?qū)堁圻M(jìn)行保鮮的微生物保鮮菌劑，該菌劑能夠降低龍眼的腐爛率，且可保持果實(shí)的色澤和口味。

【具體實(shí)施方式】

本發(fā)明一種新的短短芽孢桿菌菌株FJAT-0809-GLX是從福建省永泰縣的西瓜根際土壤中分離并篩選得到具有拮抗作用的菌株，且通過(guò)該菌株的發(fā)酵液制備獲得一種能夠?qū)堁圻M(jìn)行保鮮的微生物保鮮菌劑。