[發明專利]抗前列腺癌貽貝酶解提取物的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201010296130.6
• 申請日: 2010-09-26
• 公開（公告）號: CN101991840A
• 公開（公告）日: 2011-03-30
• 發明（設計）人: 丁國芳;楊永芳;楊最素;郁迪;黃芳芳
• 申請（專利權）人: 浙江海洋學院
• 主分類號: A61K38/01
• 分類號: A61K38/01;A61P13/08;A61P35/00;A61K35/56
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛;景豐強

技術領域

本發明涉及一種貽貝酶解提取物的制備方法，該提取物能用于抗前列腺癌。?

背景技術

多肽在生物體內可作為神經遞質、白細胞介素和細胞生長因子等活性物質，具有維持生物體生長發育、免疫調節和新陳代謝等活性功能。現有研究表明，來源于生物體的多肽具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗衰老、抗高血壓等活性功能，尤其是抗腫瘤活性已受到各國研究人員的關注。目前，有關天然肽和合成肽的抗腫瘤活性已有大量報道，并有部分多肽作為抗腫瘤藥物已應用于臨床；食物蛋白來源的多肽對于其抗菌、抗氧化、抗高血壓活性研究頗多，而對其抗腫瘤活性的相關報道較少。?

海洋生物蛋白種類繁多，來源廣泛，作為活性肽的一個重要來源，已受到越來越多的關注。貽貝作為海洋生物的一個重要組成部分，隸屬于海洋軟體動物門(Mollusca)雙殼綱(Bivalvia)貽貝目(Mytiloida)，在我國北方稱海紅，江浙稱為淡菜，富產于浙江嵊泗周圍海域。貽貝富含粗蛋白、脂肪和碳水化合物，此外還含有鈣、磷、鐵、維生素等多種微量元素。已有研究表明，貽貝提取物具有抗腫瘤、抗氧化、抗凝、降血壓、降血脂、提高免疫力等活性功能，可參考專利號為ZL200510110096.8的中國發明專利《厚殼貽貝的提取物、制造方法及其用途》(授權公告號：CN100467030C)，該專利公開了厚殼貽貝的提取物在流感上的應用。類似的還可以參考專利號為ZL200510024391.1的中國發明專利《一種可提高免疫力功能的厚殼貽貝提取物》(授權公告號為CN100486593C)；申請號為200910101136.0的中國發明專利申請公開《厚殼貽貝脂溶性提取物及其制備方法和用途》(公開號：CN101606951A)。但至今未見有關貽貝酶解產物對前列腺癌細胞作用的相關報道。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對上述的技術現狀而提供一種抗前列腺癌貽貝酶?解提取物的制備方法。?

本發明所要解決的又一個技術問題是提供一種貽貝酶解提取物在抗前列腺癌上的應用。?

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種抗前列腺癌貽貝酶解提取物的制備方法，其特征在于包括如下步驟?

①樣品的制備，將貽貝洗凈，去殼取肉并勻漿，料液比1∶3～1∶4，調節pH值至9.5～10，保溫25～30℃；?

②加入Alcalase(堿性蛋白酶)，加酶量為1500～2000u/g，酶解溫度為45～50℃，酶解時間6-8h，滅活，離心，取上清液，得酶解產物。?

作為優選，所述的Alcalase酶活力為19395～19405u/g，采用的緩沖液為pH為10的甘氨酸-NaOH緩沖液。?

所述的貽貝可以是紫貽貝、厚殼貽貝或翡翠貽貝。?

作為優選，所述的包括如下步驟?

①樣品的制備，將貽貝洗凈，去殼取肉并勻漿，料液比1∶4，調節pH值至10，保溫30℃，30min；?

②加入Alcalase，加酶量為2000u/g，酶解溫度為50℃，酶解時間8h，滅活，離心，取上清液。?

作為優選，所述的酶解產物的氨基氮為8.3337～8.3347mg/g。?

作為優選，所述的酶解產物的對前列腺癌細胞DU-145的細胞增殖抑制指數為55.36％～55.38％。?

酶解產物在抗前列腺癌上的應用。?

與現有技術相比，本發明的優點在于：通過對酶的篩選，料液比、酸堿度、加酶量、溫度及酶解時間的控制，得出了一個最佳的工藝，并產物對前列腺癌細胞具有良好的增殖抑制作用。?

附圖說明

圖1為酪氨酸標準曲線圖。?

圖2為各酶水解產物對應的ANN含量。?

圖3為各酶水解產物對應的IR含量。?

具體實施方式

以下結合附圖實施例對本發明作進一步詳細描述。?

1蛋白酶活力測定方法?