[發明專利]類單胺氧化酶C類脫水酶MaoC基因克隆及蛋白的制備方法及其應用

無效

• 申請號: 201010295972.X
• 申請日: 2010-09-28
• 公開（公告）號: CN101979589A
• 公開（公告）日: 2011-02-23
• 發明（設計）人: 張修國
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N9/14;C12N15/10;C12N15/70;C12P7/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.類單胺氧化酶C類脫水酶基因，其特征在于：其基因序列如Seq?ID?No：1所示；其蛋白質氨基酸序列為SEQ?ID?NO：2所示。

2.如權利要求1所述類單胺氧化酶C類脫水酶基因分離克隆及其蛋白質制備方法，其步驟如下：

1)MaoC基因分離克隆的具體步驟：

A：采用CTAB法提取辣椒疫霉菌基因組DNA，備用；

B：根據已公布的辣椒疫霉全基因組草圖序列，經生物信息學分析獲得目的基因MaoC的序列，設計特異引物，其序列如Seq?ID?No：3及Seq?ID?No：4所示，經PCR克隆得到MaoC基因全長序列；

2)制備蛋白質的具體步驟：

A：將MaoC基因原核表達載體構建，目的基因克隆至pET28a(+)表達載體中；

B：將上述重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態細胞，異丙基硫代-β-D-半乳糖苷誘導表達。；

C：表達產物酶活性檢測、SDS-GAGE分析及純化。

3.類單胺氧化酶C類脫水酶基因，應用于制備生物降解物質聚羥基脂肪酸酯。