[發(fā)明專利]一種特異識別志賀氏菌的核酸適配子及其篩選方法與應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010295767.3 | 申請日： | 2010-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN102010866A | 公開（公告）日： | 2011-04-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王周平;丁曉瑩 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/115 | 分類號： | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/10 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 特異 識別 志賀氏菌 核酸 配子 及其 篩選 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種特異識別志賀氏菌的核酸適配子及其篩選方法與應(yīng)用，其特征在于：所述寡核苷酸適配子的核苷酸序列如序列表中序列1-5所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異識別志賀氏菌的寡核苷酸適配子的制備方法，包括下列步驟：
(1)隨機單鏈DNA(ssDNA)文庫的構(gòu)建和引物
隨機單鏈DNA(ssDNA)文庫：5′-ATAGGAGTCACGACGACCAGAA-(N40)-TATGTGCGTCTACCTCTTGACTAAT-3′；
引物I：5′-ATAGGAGTCACGACGACCAGAA-3′；
引物II：5′-ATTAGTCAAGAGGTAGACGCACATA-3′
(2)PCR制備隨機ssDNA文庫；
(3)SELEX篩選志賀氏菌的核酸適配子；
(4)DNA克隆和測序
(5)適配子序列一級結(jié)構(gòu)和二級結(jié)構(gòu)分析
(6)適配子親和力和特異性鑒定。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異識別志賀氏菌的寡核苷酸適配子在檢測志賀氏菌方面的應(yīng)用，其特征在于所述寡核苷酸適配子是體外化學(xué)合成的，或是通過PCR或其他分子生物學(xué)方法制備的。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的應(yīng)用，其特征在于所述寡核苷酸適配子的5′端或3′端可以經(jīng)過FITC(FAM)、生物素、地高辛等標(biāo)記。
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