[發(fā)明專利]生產(chǎn)靈菌紅素的菌株及其方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010295552.1
• 申請日: 2010-09-28
• 公開（公告）號: CN102002469A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉曉俠;陳曉麗;胡星夏
• 申請（專利權(quán)）人: 嘉興學(xué)院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/16;C12R1/43
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種生產(chǎn)靈菌紅素的菌株，保藏號為CGMCC?4074。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)靈菌紅素的菌株，其特征是所述菌株所成的菌落呈紅色，不透明，菌體為0.5～1.0μm×0.8～1.2μm。

3.一種發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，包括如下步驟：

1)菌種培養(yǎng)：將權(quán)利要求1所述菌株在LB固體培養(yǎng)基于25-40℃恒溫培養(yǎng)；

2)種子液的制備：將步驟1)固體培養(yǎng)基上的單菌落接入裝有液體培養(yǎng)基的容器中，裝液量為容器體積1/3-1/4，于20-40℃下恒溫培養(yǎng)10-24小時，轉(zhuǎn)速為150-220rpm；

3)搖瓶液體發(fā)酵：將步驟2)種子液轉(zhuǎn)入滅菌后的液體發(fā)酵培養(yǎng)中，接種量為1-10v/v％，裝液量50ml/250ml搖瓶，于28-38℃恒溫培養(yǎng)48-72h，轉(zhuǎn)速150-220rmp；

4)提取靈菌紅素。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述提取靈菌紅素的方法為：把所述步驟3)的發(fā)酵液離心處理，上清液加等體積的乙酸乙酯萃取，振蕩20min，靜置30min分層，8000rpm離心10min，收集上相乙酸乙酯，發(fā)酵液離心殘渣加與原發(fā)酵液等體積的丙酮，振蕩10min，靜置10min，8000rpm離心10min，殘渣繼續(xù)用丙酮反復(fù)抽提3次，所得上相與乙酸乙酯相混合，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到紅色素靈菌紅素粗品。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的液體培養(yǎng)基的組成，以重量體積百分比計，甘油0.1-2.0％，蛋白胨0.8-1.2％，酵母粉0.5-1.0％，NaCl?1.0-2.0％，pH值為5.0-9.0。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的組成，以重量體積百分比計，碳源1-10％，氮源0.5-3％，氨基酸0.04-4％，NaCl?0-5％，MgCl₂0.01-0.1％，pH值為5.0-9.0。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的碳源為甘油、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、果糖、豆油和芝麻油之一種或幾種。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的氮源為蛋白胨、酵母膏、玉米漿、豆餅粉、芝麻粉、花生粉、(NH₄)₂SO₄和硝酸鹽之一種或幾種。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的氮源含量為0.5-2％。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的氨基酸為甘氨酸、脯氨酸或天冬氨酸。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的甘氨酸含量為0.2％-0.4％。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法，其特征是所述的脯氨酸或所述的天冬氨酸含量為0.04-0.2％。