[發明專利]齊墩果酸的抗肝癌作用及其藥物制劑

無效

• 申請號: 201010292689.1
• 申請日: 2010-09-27
• 公開（公告）號: CN102106860A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發明（設計）人: 林秀坤;廖德忠;劉海洲
• 申請（專利權）人: 林秀坤
• 主分類號: A61K31/56
• 分類號: A61K31/56;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明是涉及齊墩果酸（Oleanolic?acid?）在抗肝癌方面的應用及其藥物制劑，屬于中藥領域。

背景技術

??齊墩果酸（Oleanolic?acid?）是五環三萜類化合物，以游離體和配糖體的形式存在于多種植物中。主要提取來源木犀科植物齊墩果的葉，女貞果實；龍膽科植物青葉膽全草，川西獐牙菜；傘形科植物大星芹的葉、根；五加科植物楤木的根皮及莖皮；葫蘆科植物大籽雪膽，可愛雪膽，中華雪膽的塊根。

齊墩果酸已報道的藥用作用主要有護肝降酶、促進肝細胞再生、抗炎、強心、利尿，還具有降血糖、降血脂、鎮靜等作用，是開發治療肝病和降血糖等藥物的有效成分。我們在篩選抗腫瘤藥物過程中發現齊墩果酸具有較強的抑制肝癌細胞及其實體瘤生長的作用。

在本發明之前未見以齊墩果酸為原料制備藥物劑型并用于預防和治療肝癌的報道。齊墩果酸是五環三萜類化合物，幾乎無毒，中藥資源極為豐富，是一種非常有前途的抗腫瘤藥物。?

齊墩果酸（Oleanolic?acid?）的化?學?名：3β-hydroxy-olea-12-en-28-oic?acid；分子式C₃₀H₄₈O₃；分子量：456.71。

化學結構式：

發明內容

本發明的目的之一是提供了齊墩果酸的藥物制劑；

本發明的目的之二是提供了齊墩果酸的抗腫瘤新用途。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

本發明的藥物制劑含有1%-99%的齊墩果酸和99%-1%的賦形劑（包括其它配用的藥物），優選含有20%-80%的齊墩果酸和80%-20%的賦形劑（包括其它配用的藥物），最好含有60%-70%的齊墩果酸和40%-30%的賦形劑（包括其它配用的藥物）。

按藥劑學方法，可以將本發明的齊墩果酸制備成多種臨床藥物劑型作為抗肝癌藥物，包括口服制劑或非腸道給藥的劑型。所說的口服制劑選于片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、微囊片劑、混懸劑、滴丸、口服液體制劑中的任何一種；所說的非腸道給藥劑型選自于注射劑、氣霧劑、栓劑或皮下給藥劑型當中的一種。

本發明的抗肝癌藥物中的輔料是指常規的賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑等。本發明的抗腫瘤藥物中的其它配伍用的藥物，指的是以有效劑量的齊墩果酸為一定的藥物原料，再配伍其它已允許合用的中藥或化學藥品。

本發明的齊墩果酸藥物制劑具有抗肝癌作用，是通過以下的藥效學試驗得到證實的。

試驗例1?考察了齊墩果酸對體外肝癌細胞的抑制作用

細胞：人肝癌細胞（BEL-7402）。為中科院海洋所海洋藥物實驗室提供。

藥品及試劑：齊墩果酸（Oleanolic?acid?）中科院海洋所海洋藥物實驗室提供，白色粉末；5-氟脲嘧啶（5-FU）江蘇南通精華制藥有限公司產品，批號為100402；?MTT（SIGMA，USA）；DMSO（SIGMA，USA）；胰蛋白酶（SIGMA，USA）；RPMI1640（GIBCO，Invitragen?Co.，USA）；DMEM（GIBCO，Invitragen?Co.，USA）；優級胎牛血清（GIBCO，Invitragen?Co.，USA）；特級胎牛血清Fetal?Bovine?Serum（Hyclone）。?

儀器：超低溫冰箱（Nature，USA），細胞培養箱（SANYO，Japan），倒置顯微鏡（NIKON，Japan），酶標儀（Bio-Tek?Instruments，Inooski，VT，USA），PH計（Thermo?orion，USA），超凈工作臺（FLC-哈爾濱東聯儀器廠）。

實驗方法MTT法：將腫瘤細胞株按照常規方法培養傳代，收集對數生長期細胞，調節細胞懸液濃度5×10⁴個/ml左右。將細胞懸液加入96孔培養板中，每個孔加入180?μl。置于37℃恒溫培養箱中培養24?h后，實驗組加入各濃度齊墩果酸（以5-FU作為陽性對照組）20μl/孔，每組各設4個平行孔，并設空白孔（只加入溶解藥用的溶劑）以調零。在培養箱37℃，培養48?h后，用移液槍將96孔板中液體洗凈后每孔加入MTT（1?mg/ml）30?μl，置CO₂培養箱37℃?培養4?h，棄去上清，每孔加入DMSO?150?μl，置搖床搖勻30?min，用酶標儀在492?nm下檢測，利用SPSS統計軟件，計算細胞死亡率，求取IC₅₀。