[發明專利]一種聯合檢測相思子毒素和蓖麻毒素的膠體金試紙及專用單克隆抗體

無效

• 申請號: 201010291887.6
• 申請日: 2010-09-26
• 公開（公告）號: CN102020714A
• 公開（公告）日: 2011-04-20
• 發明（設計）人: 王景林;高姍;聶聰;王俊虹;王利春;康琳;周陽
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;G01N33/558;G01N33/577
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種聯合檢測相思子毒素和蓖麻毒素的膠體金試紙及專用單克隆抗體。

背景技術

相思子毒素(Abrin)和蓖麻毒素(Ricin)是從植物種子中分離的毒性很強的植物毒素，其中相思子毒素分子量約為62KD，pI6.9；蓖麻毒素分子量約為65KD，pI7.3。這兩種毒素具有相同的AB鏈結構和相同的致病機制，而且分子量大小也相似，具有較高的同源性。

自美國遭受9.11恐怖襲擊和炭疽芽孢事件發生后，世界各國開始高度關注生物恐怖襲擊。由于這兩種毒素天然資源比較豐富，制備比較容易，并且借助當今高度發達的生物工程技術手段，還能夠實現大批量生產。毒素中毒后無特異癥狀，出現癥狀時已經造成機體嚴重的器質損害，給中毒的治療及預防帶來極大的難度，具備生物毒素武器典型特征，因此歷來為外軍所高度重視，相思子和蓖麻毒素均被美國疾病預防控制中心(Centers?for?Disease?Control，CDC)列為最有可能作為生物恐怖襲擊的生物戰劑。這兩種毒素具有極強的細胞毒性作用，相思子毒素為IC₅₀4.8×10-11mol/L(兔網織紅細胞)，小鼠腹腔LD₅₀達0.04μg/kg；而蓖麻毒素IC50為1.8×10-10mol/L(Hela細胞)；小鼠腹腔注射LD₅₀3μg/kg。

因此，在當前國內外嚴峻的反恐形勢下，尋求新的對相思子毒素和蓖麻毒素快速、有效的鑒定方法，具有十分現實的軍事和民防價值。而對于相思子和蓖麻毒素的檢測和鑒定，傳統的方法已不能滿足當前反恐形勢的要求。因此，發展和建立多重、特異、靈敏的相思子和蓖麻毒素檢測方法是十分急需、重要的。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種抗相思子毒素的單克隆抗體。

本發明所提供的抗相思子毒素的單克隆抗體，是由保藏編號為CGMCC?No.4062的Abrin-a?A鏈單克隆抗體細胞株分泌的。

保藏編號為CGMCC?No.4062的Abrin-a?A鏈單克隆抗體細胞株也屬于本發明的保護范圍。

本發明的另一個目的是提供一種用于檢測相思子毒素和/或蓖麻毒素的膠體金試紙。

本發明所提供的用于檢測相思子毒素和/或蓖麻毒素的膠體金試紙，包括樣品墊、膠金墊、反應墊和吸收墊，其依次連接；所述膠金墊包被有膠體金探針；所述反應墊上設有檢測位置1、檢測位置2和質控位置，檢測位置1包被有抗相思子毒素的抗體，檢測位置2包被有抗蓖麻毒素的抗體，質控位置包被有抗抗體；所述膠體金探針為如下1)和2)的混合物：1)膠體金與抗相思子毒素的抗體的偶聯物；2)膠體金與抗蓖麻毒素的抗體的偶聯物。

上述膠體金試紙中，檢測位置1包被的抗相思子毒素的抗體和膠體金與抗相思子毒素的抗體的偶聯物中，抗相思子毒素的抗體可為單抗也可為多抗。

上述膠體金試紙中，檢測位置2包被的抗蓖麻毒素的抗體和膠體金與抗蓖麻毒素的抗體的偶聯物中，抗蓖麻毒素的抗體可為單抗也可為多抗。

上述膠體金試紙中，所述檢測位置1包被的抗相思子毒素的抗體中，所述抗相思子毒素的抗體是由保藏編號為CGMCC?No.4062的Abrin-a?A鏈單克隆抗體細胞株分泌的。

上述膠體金試紙中，所述檢測位置2包被的抗蓖麻毒素的抗體中，所述抗蓖麻毒素的抗體為抗蓖麻毒素的多克隆抗體；所述膠體金與抗蓖麻毒素的抗體的偶聯物中，所述抗蓖麻毒素的抗體為抗蓖麻毒素的多克隆抗體。該多克隆抗體具體可以是以脫毒的蓖麻毒素為免疫原免疫兔得到的。其中蓖麻毒素的氨基酸序列具體可如SEQ?ID?NO：2所示。

上述膠體金試紙中，所述膠體金與抗相思子毒素的抗體的偶聯物中，所述抗相思子毒素的抗體為抗相思子毒素的多克隆抗體。該多克隆抗體具體可以是以脫毒的相思子毒素為免疫原免疫兔得到的。其中相思子毒素的氨基酸序列具體可如SEQID?NO：1所示。

上述膠體金試紙中，所述檢測位置2包被的抗蓖麻毒素的抗體中，所述抗蓖麻毒素的抗體為兔來源的抗蓖麻毒素的多克隆抗體；所述膠體金與抗相思子毒素的抗體的偶聯物中，所述抗相思子毒素的抗體為兔來源的抗相思子毒素的多克隆抗體；所述膠體金與抗蓖麻毒素的抗體的偶聯物中，所述抗蓖麻毒素的抗體為兔來源的抗蓖麻毒素的多克隆抗體。

上述膠體金試紙中，所述檢測位置1包被的抗相思子毒素的抗體的濃度為2mg/mL，所述檢測位置2包被的抗蓖麻毒素的抗體的濃度為1.5mg/mL。