[發(fā)明專利]快速檢測滴滴涕代謝物的免疫膠體金試紙條以及其制法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010291395.7 | 申請日: | 2010-09-19 |
| 公開(公告)號: | CN102411054A | 公開(公告)日: | 2012-04-11 |
| 發(fā)明(設計)人: | 劉仁沿;梁玉波;劉磊;許道艷 | 申請(專利權)人: | 國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/558 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 116023 遼*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 快速 檢測 滴滴涕 代謝物 免疫 膠體 試紙 及其 制法 | ||
1.一種快速檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕(1,1,1-trichloro-2,2-bis-p-chlorophenyl-ethane,DDT)代謝物的免疫膠體金試紙條,包括樣本墊、膠金墊、賽多利斯NC膜、吸水紙和PVC背襯,其特征是:在PVC背襯上按順序依次粘附有樣本墊、膠金墊、賽多利斯NC膜、吸水墊,膠金墊為包被抗滴滴涕代謝物DDA的單克隆抗體-膠體金標記物的膠金墊,賽多利斯NC膜上分別包被2,2-雙(4-氯苯基)乙酸(DDA)-蛋白偶聯(lián)物構成的檢測線和羊抗鼠抗體構成的質(zhì)控線。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種快速檢測滴滴涕代謝物的免疫膠體金試紙條,其特征是:抗滴滴涕代謝物單克隆抗體為用2,2-雙(4-氯苯基)乙酸-牛血清蛋白偶聯(lián)物免疫Balb/c小鼠,經(jīng)細胞融合,篩選得到抗DDA單克隆抗體的雜交瘤細胞系分泌的。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的一種快速檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕DDT代謝物的免疫膠體金試紙條,其特征是:樣本墊、膠金墊、NC膜、吸水墊按順序依次粘附在PVC背襯上并裝在試紙條卡里,上面開有加樣孔和顯色區(qū)。
4.根據(jù)權利要求1或2所述的一種快速檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕DDT代謝物的免疫膠體金試紙條,其特征是:其為檢測滴滴涕代謝物DDA的試紙條。
5.一種快速檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕DDT代謝物DDA的免疫膠體金試紙條的制備方法,其步驟包括:
(1)將2,2-雙(4-氯苯基)乙酸與載體蛋白偶聯(lián),制備得到2,2-雙(4-氯苯基)乙酸-載體蛋白偶聯(lián)物;
(2)用2,2-雙(4-氯苯基)乙酸-牛血清蛋白偶聯(lián)物免疫Balb/c小鼠,經(jīng)細胞融合,篩選得到分泌抗滴滴涕代謝物單克隆抗體的雜交瘤細胞系;
(3)制備抗滴滴涕代謝物DDA單克隆抗體;
(4)用檸檬酸三鈉與氯金酸反應制備膠體金;
(5)將步驟(3)制得的抗DDA單克隆抗體加入步驟(4)制備得到的膠體金中,得到抗滴滴涕代謝物單克隆抗體-膠體金標記物;
(6)將抗滴滴涕代謝物單克隆抗體-膠體金標記物噴點(包被)在膠金墊上;
(7)將2,2-雙(4-氯苯基)乙酸-卵清蛋白偶聯(lián)物噴點(包被)在NC膜上構成檢測線,并將羊抗鼠抗體噴點(包被)在NC膜上構成質(zhì)控線;
(8)將樣本墊、膠金墊、NC膜、吸水墊按順序依次粘附在PVC背襯上,并包裝在試紙條卡里,上面開有加樣孔和顯色區(qū),得到所述的檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕(DDT)代謝物DDA的免疫膠體金試紙條。
6.快速檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕DDT代謝物DDA的免疫膠體金試紙條在檢測有機氯農(nóng)藥滴滴涕(DDT)代謝物中的應用。
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