[發(fā)明專利]一種人少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤標志物MAP2蛋白及其用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010290758.5
• 申請日: 2010-09-21
• 公開（公告）號: CN102408478A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發(fā)明（設計）人: 施前;楊柳松;徐曉恩
• 申請（專利權(quán)）人: 復旦大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;G01N33/53;G01N27/62;G01N21/64
• 代理公司: 上海元一成知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

1.一種人少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤標志物MAP2蛋白，其特征在于，所述的MAP2蛋白其分子量為199526Da。

2.一種檢測人少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤標志物MAP2蛋白的方法，其特征在于，在完整離體的腫瘤組織中篩選差異蛋白，然后用抗體進行免疫印跡和免疫組化后續(xù)驗證，獲得差異蛋白MAP2蛋白。

3.按權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，其包括步驟：

1)制備少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤冰凍標本和石蠟包埋標本，

分別將離體的腫瘤標本速凍并于-80℃保存，制備少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤冰凍標本，組織學評估所述腫瘤組織中腫瘤細胞的含量超過80％；福爾馬林固定和石蠟包埋制得少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤石蠟包埋標本；

2)三色FISH技術(shù)分析檢測染色體臂1p上等位基因的缺失

用1p36微缺失綜合癥的特異性三色熒光標記探針，檢測染色體臂1p上等位基因的缺失；

3)基于iTRAQ-LC-MS/MS技術(shù)的蛋白質(zhì)組分析蛋白質(zhì)譜，尋找差異蛋白

直接采用離體的腫瘤組織獲得高豐度的蛋白后，順序進行蛋白純化、消化裂解后，再用iTRAQ試劑進行差異標記及樣品混合，離心干燥，色析分離，再經(jīng)四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜進行蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)分析，確定1p缺失和非缺失的少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤間的差異蛋白；

4)免疫印跡和免疫組化檢測

用Western?blot對挑選出的差異蛋白進行驗證。

4.MAP2蛋白在制備檢測1P等位基因雜合性缺失存在與否的生物標志物中的用途。

5.MAP2蛋白在制備1P等位基因雜合性缺失存在狀態(tài)的決策樹分析模型中的用途。

6.一種檢測試劑盒，其特征在于，其含有權(quán)利要求1所述的人少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤標志物MAP2蛋白。

7.一種診斷1p等位基因缺失的少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤化療敏感性的試劑盒，其特征在于，其含有權(quán)利要求1所述的MAP2蛋白。