[發明專利]抑制2型志賀毒素活性的多肽TF1及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201010290461.9
• 申請日: 2010-09-25
• 公開（公告）號: CN102040654A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發明（設計）人: 王慧;李濤;侯曉軍;王琴;屠偉;劉越男;史晶;蔡昆
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C12N15/11;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;A61K38/10;A61P31/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及抑制2型志賀毒素活性的多肽TF1及其編碼基因與應用。

背景技術

志賀毒素(Shiga?Toxin，Stx)，又稱志賀樣毒素(Shiga-like?Toxin，Slt)作為腸道病原菌產生的一類具有腸毒性、細胞毒性和神經毒性的細菌外毒素，包括1型、2型志賀毒素(Stx1，Stx2)，是急性細菌性痢疾、霍亂O139、O157:H7等新發腸道病原菌最為關鍵的強致病毒力因子，可以引起出血性結腸炎(hemorrhagic?colitis，HC)、血栓形成性血小板減少性紫癜(TTP)以及高病死率的溶血性尿毒癥(hemolytic?uremic?syndrome，HUS)等嚴重并發癥。而流行病學研究和臨床資料均表明，相比較Stx1，Stx2與感染并發癥，特別是HUS發生的相關性更高，被認為是重要的防治藥物設計靶標。

目前針對志賀毒素相關病原菌的重癥感染尚無特異有效的預防產品和急救治療藥物。臨床普遍采用的抗生素治療已經引起多重耐藥菌株的出現，造成抗生素治療的失效。抗生素使用造成更加不利的后果是菌體崩解引發志賀毒素過量釋放，加大了由毒素引發各種并發癥的風險。因此針對志賀毒素相關疾病的治療主張慎用抗生素，而應尋求特異性藥物作為新的有效治療手段。

Stx2(又稱Slt2)由1個志賀毒素A亞單位(Stx2A)和5個志賀毒素B亞單位(Stx2B)組成，毒素通過Stx2B介導與真核細胞表面的Gb3受體結合，進而Stx2A作用于細胞28S?rRNA引起細胞病變。Stx2B與細胞Gb3受體的結合是毒素發揮作用的起始關鍵環節，如能阻斷這種結合，將從根本上抑制Stx2分子毒性的發揮。國內外研究方向主要集中在毒素受體類似物和抗體治療方面。Nishikawa報道了能與Stx結合的多糖化合物，具有潛在的治療應用價值(Nishikawa?K，Matsuoka?K，Watanabe?M，et?al.Identification?of?the?optimal?structure?required?for?a?Shiga?toxin?neutralizer?with?oriented?carbohydrates?to?function?in?the?circulation.J?Infect?Dis?2005；191：2097-2105.)；2002年Natori?Y.報道了Gb3受體治療的實例(Natori?Y.New?drugs?that?prevent?cytotoxicity?of?Shiga?toxins.Nippon?Rinsho.2002.60(6)：1131-1137.)，包括一種能在胃腸道途徑阻止毒素擴散的新制劑和另一種可在循環系統抑制志賀毒素毒性的水溶性制劑。但是受體類多糖化合物的復雜制備工藝和副作用成為制約其發展的障礙。最近，有學者報道可表達毒素模擬受體的益生菌具有顯著的毒素中和效果，可用于治療志賀毒素相關疾病(Paton?JC，Rogers?TJ，Morona?R，Paton?AW.Oral?administration?of?formaldehyde-killed?recombinant?bacteria?expressing?a?mimic?of?the?Shiga?toxin?receptor?protects?mice?from?fatal?challenge?with?Shiga-toxigenic?Escherichia?coli.Infect?Immun?2001；69：1389-1393.)，但是這種活菌治療的安全性有待進一步考察和驗證。在抗體治療方面，Sheoran等研究報道的單克隆抗體能夠阻斷Stx2與細胞受體的結合，中和Stx2細胞毒性(Sheoran?AS，Chapman-Bonofiglio?S，Harvey?BR，et?al.Human?antibody?against?shiga?toxin?2administered?to?piglets?after?the?onset?of?diarrhea?due?to?Escherichia?coli?O157:H7prevents?fatal?systemic?complications.Infect?Immun?2005；73：4607-4613.)，但臨床應用有待于抗體制備工藝的改進完善。