[發(fā)明專利]一種硫化氫產(chǎn)生酶制劑及其用途

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010290363.5
• 申請(qǐng)日: 2010-09-25
• 公開（公告）號(hào): CN101940785A
• 公開（公告）日: 2011-01-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳根福
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K38/51
• 分類號(hào): A61K38/51;A61K38/43;A61K33/04;A61K47/24;A61K47/26;A61K9/00;A61K9/70;A23L1/29;A61P1/04;A61P9/12;A61P9/10;A61P1/00;A61P3/00;A61
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及酶制劑及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種硫化氫產(chǎn)生酶制劑及其用途。

背景技術(shù)

長期以來，硫化氫一直被認(rèn)為是一種有毒的氣體。然而最近研究表明，硫化氫作為氣態(tài)信號(hào)分子在多種生理過程中發(fā)揮重要作用，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，顯示出極大的治療性應(yīng)用前景。

正常情況下，機(jī)體的穩(wěn)態(tài)可通過神經(jīng)和體液系統(tǒng)進(jìn)行內(nèi)源調(diào)節(jié)。一氧化氮和一氧化碳是兩類早已確認(rèn)的內(nèi)源氣態(tài)調(diào)節(jié)因子，最近，硫化氫被證實(shí)為第三種氣態(tài)信號(hào)分子，共同參與穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)。研究表明，正常機(jī)體組織中存在著一定濃度的硫化氫(如大鼠血清中約含46μM硫化氫，哺乳動(dòng)物腦組織中約含50-160μM硫化氫，哺乳動(dòng)物胃腸道中的硫化氫濃度更高，達(dá)0.2～3.4mM)，它們1/3以氣態(tài)形式存在，2/3以離子(主要是HS-)形式存在。這些內(nèi)源性硫化氫主要由兩類磷酸吡哆醛依賴性酶：胱硫醚β-合酶(cystathionine?β-synthase，CBS，EC?4.2.1.22)和胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase，CGL；又稱為γ-胱硫醚酶，γ-cystathionase，CSE，EC?4.4.1.1)催化產(chǎn)生。硫化氫可直接作用于K_ATP通道，通過減少細(xì)胞外Ca²⁺的內(nèi)流及促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放內(nèi)皮超極化因子等方式來舒張血管平滑肌，同時(shí)，還可通過對(duì)絲裂原激活蛋白激酶的作用抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，促進(jìn)其凋亡，改善血管重構(gòu)。

硫化氫的主要生理功能有：

治療消化道潰瘍：非甾體類抗炎藥(NSAIDs)廣泛用于關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱和疼痛癥狀的緩解，但易引發(fā)消化性潰瘍。研究顯示NSAIDs抑制胃及腸粘膜細(xì)胞CSE的表達(dá)，減少硫化氫的生成，如預(yù)先給大鼠注射NaHS，則可增加胃和腸粘膜血流，減少服用NSAIDs后引起的粘膜損傷(Sivarajah?etal.，Shock.2006，26：154-161)。在大鼠的胃腸道潰瘍模型中，使用NSAIDs會(huì)延緩愈合的進(jìn)程，而硫化氫供體或L-半胱氨酸可加速潰瘍的愈合(Wallace?et?al.，F(xiàn)ASEB?J.2007，21：4070-4076)。兩種能釋放硫化氫的NSAIDs衍生物，ATB337(雙氯芬酸衍生物)和ATB343(吲哚美辛衍生物)，可抑制前列腺素合成以及環(huán)氧化酶的活性，阻止白細(xì)胞粘附到血管內(nèi)皮，而不會(huì)引起胃腸道粘膜損傷(Wallace，Trends?PharmacolSci.2007，28：501-505)，說明硫化氫與NSAlDs聯(lián)用能減少NSAIDs的致潰瘍副作用。

維持血壓穩(wěn)定：研究表明，自發(fā)性或誘發(fā)性高血壓大鼠的血漿中硫化氫濃度顯著低于正常大鼠，如果靜脈注射或腹腔注射NaHS(一種硫化氫的供體)，不僅可提高血漿中的硫化氫水平，還能顯著降低大鼠的血壓(Shiet?al.，American?J?Physiology?Heart?and?Circulation?Physiology.2007，293：2093-2100)。對(duì)正常大鼠體外灌注胱硫醚β-合酶或胱硫醚γ-裂解酶的激活劑，可使受試動(dòng)物的血壓降低，反之，如果灌注這些酶的抑制劑，則會(huì)使受試動(dòng)物的血壓升高(Webb?et?al.，J?Pharm?Experiment?Threapeut.2008，324：876-882)。Yang等用敲除CSE基因的突變小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)這種突變小鼠其硫化氫的水平顯著下降，并表現(xiàn)出明顯的高血壓傾向和依賴內(nèi)皮的血管舒張功能喪失，如果靜脈注射或腹腔注射NaHS，可使血壓回歸正常(Science，2008，322：587-590)，這些研究都說明硫化氫在血管擴(kuò)張和血壓調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮著重要作用。

保護(hù)心臟：心肌缺血損傷的大鼠其血漿硫化氫水平顯著降低，心肌CSE活性下調(diào)，外源性給予NaHS可以改善左室收縮功能和舒張功能、降低心肌缺血損傷大鼠的死亡率，還可減少心肌纖維原細(xì)胞的增生和肥大，減少脂質(zhì)過氧化作用(Ji?et?al.，EurJPharmacol.2008，587：1-7)。在大鼠心肌缺血/再灌注模型中，缺血前15min預(yù)先給予NaHS能明顯保護(hù)心臟功能，減少心肌梗死面積，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞再生(Bliksoen?et?al.，EurJ?Cardiothorac?Surg.2008，34：344-349)，說明硫化氫對(duì)缺血心肌具有保護(hù)作用。