[發(fā)明專利]一種NOB1基因在腦膠質瘤疾病中的應用

無效

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• 申請日: 2010-09-14
• 公開（公告）號: CN101948921A
• 公開（公告）日: 2011-01-19
• 發(fā)明（設計）人: 陳菊祥;盧亦成;孫克華;周勁旭
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N5/09;A61K49/00
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達;謝文凱

技術領域

本發(fā)明涉及腦膠質瘤發(fā)病機制的研究領域，具體涉及一種NOB1基因在腦膠質瘤疾病中的應用。

背景技術

膠質瘤是來源于中樞神經系統支持細胞的具有高侵襲性和致死性的實體腫瘤，可分為星形細胞瘤、少突膠質細胞瘤和少肢星形細胞瘤。星形細胞瘤占膠質瘤的80～85％，根據病理可分為I級至IV級。IV級膠質瘤又稱膠質母細胞瘤，是膠質瘤中最常見的病理類型，預后很差。雖然在膠質瘤治療方面研究者做了大量的工作，但是部分膠質母細胞瘤的患者生存期仍然低于15個月。雖然在膠質瘤的病因和預后方面有大量的研究，但是在膠質瘤的基因水平的研究仍然處于起步階段。

在真核細胞中，蛋白酶體26S是一種蛋白水解復合物，可以將多泛素化的蛋白降解為小的多肽。蛋白酶體26S由兩個亞復合體組成：起催化作用的20S蛋白酶體和起調節(jié)作用的19S顆粒。19S調節(jié)顆粒又由分別起底和蓋作用的兩個亞復合體組成。底由6個有蛋白酶體活性的ATP酶(Rpt1-Rpt6)和2個非ATP酶的亞基(Rpn1和Rpn2)組成。蓋則由Rpn3，5，6，7，8，9，10，11，12組成。以Rpn12為誘餌進行的雙雜合測試，第一次將酵母菌的Nob1蛋白(Nob1p)分離出來。越來越多的證據表明在酵母菌中，Nob1p在蛋白酶體形成和RNA代謝中起重要作用。Nob1p通過起分子伴侶的作用將20S蛋白酶體催化亞復合物和19S調節(jié)顆粒結合在一起，從而形成26S蛋白媒體，同時降解Ump1p。Nob1p的基因缺失嚴重抑制20S?pre-rRNA向成熟的18S?rRNA轉化，提示Nob1p參與rRNA的加工。另外，Nob1蛋白的PIN域可以結合18S?rRNA的單鏈切割位點D。

26S蛋白酶體通過泛素-蛋白酶體途徑催化蛋白質的降解，從而從多方面調節(jié)真核生物細胞周期，包括通過檢查點和細胞外環(huán)境調控細胞周期不同期間間的進程。已有的數據表明多種參與催化20S蛋白酶體、19S調節(jié)子組成26S蛋白酶體的酶在細胞周期和細胞生存期中扮演重要角色。Thaker等人應用干擾RNA篩選到55個對于人類膠質母細胞瘤的存活具有重要作用的基因，其中22％(12/55)的基因組成20S和26S蛋白酶體亞基。它們參與到細胞的多種過程中，包括蛋白質泛素化，嘌呤和嘧啶的代謝，核苷的切除修復，以及NF-kappaB信號通路。雖然以上各種調控通路的異常在惡性細胞中都已觀察到，但蛋白酶體功能缺陷與人類膠質瘤相關方面還缺乏研究。

人類NOB1的同源基因已于數年前克隆出來。人NOB1基因編碼一個50KDa大小的蛋白，包含一個PIN域(PilT?amino?terminus)和zinc?ribbon域，主要在肝臟、肺和脾臟表達。但是NOB1基因的具體功能還不清楚，到目前為止國際上無文獻報道有關NOB1基因在腦膠質瘤疾病中應用的內容。

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的技術問題之一是提供一種NOB1基因在腦膠質瘤疾病中的應用，不論在體內還是體外，NOB1對腦膠質瘤的發(fā)生都是必須的，并且根據NOB1基因在腦膠質瘤組織中的表達結果，為今后膠質瘤的生物靶向治療提供強有力手段。

本發(fā)明涉及一種NOB1基因在腦膠質瘤疾病中的應用。

所述的NOB1基因調控人神經膠質瘤細胞周期，降低NOB1水平導致細胞周期的G1期停滯。

所述的NOB1基因調控人神經膠質瘤細胞的增殖，抑制NOB1使膠質瘤細胞生長遲滯。

所述的NOB1基因對人神經膠質瘤細胞體外和體內的腫瘤形成有關，NOB1的減少阻抑人神經膠質瘤細胞腫瘤的發(fā)生。

相對于低級別膠質瘤和正常腦組織，所述的NOB1在高級別膠質瘤組織中表達水平明顯增高。

所述的高級別和低級別膠質瘤組織中NOB1表達水平具有顯著性差異，即P＝0.049。

與正常腦組織相比，所述的NOB1基因在高級別的膠質瘤中的平均表達增加至近4倍水平，即P＝0.017，而在低級別膠質瘤中僅增加1.5倍，即P＝0.032。

表達低水平NOB1即P＝0.028的患者生存期超過24個月，表達較高水平NOB1即P＜0.01的患者存期短于24個月。

所述的表達較高水平NOB1的膠質瘤患者預后較差。