[發(fā)明專利]一種煙草黑脛病抗性的苗期恒溫水培鑒定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010280169.9
• 申請(qǐng)日: 2010-09-14
• 公開（公告）號(hào): CN101999287A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李梅云;劉勇;冷曉東;李永平;肖炳光;盧秀萍;李祥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省煙草農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A01G1/00
• 分類號(hào): A01G1/00;A01G31/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責(zé)任公司 53100
• 代理人: 陳左

1.一種煙草黑脛病抗性的苗期恒溫水培鑒定方法，其特征在于按以下順序步驟：

1)池水保溫循環(huán)漂浮池建造

在玻璃溫室或塑料大棚溫室內(nèi)建造漂浮池，池底墊一層厚約4cm的泡沫塑料板，鋪兩層塑料膜，池壁四周用泡沫塑料板保溫；池內(nèi)水深5cm～20cm，一端設(shè)控溫電加熱棒和池水循環(huán)泵，控溫電加熱棒和池水循環(huán)泵通過控溫裝置聯(lián)動(dòng)，池水為深井水或自來水，控制水溫為24.0℃～32.0℃；

2)煙苗移植

以革新三號(hào)、G28品種為抗病對(duì)照，以紅花大金元品種為感病對(duì)照，煙苗一次剪葉后，苗齡30d～50d時(shí)，每個(gè)待鑒定材料挑選45株，移植到新的漂浮盤中；漂浮池營(yíng)養(yǎng)液的氮素濃度控制在100mg/kg～250mg/kg；根據(jù)池水蒸發(fā)量，經(jīng)常補(bǔ)充池水至初始水深，采用自動(dòng)溫濕度記錄儀每小時(shí)記錄一次水溫；

3)接種體制備及接種

煙草黑脛病菌活化后，接種燕麥液體培養(yǎng)基，在28℃、150rpm的搖床上培養(yǎng)2周，按質(zhì)量比例加0.1％硝酸鉀到培養(yǎng)基溶液中，混合得到游動(dòng)孢子懸浮菌液；吸取游動(dòng)孢子懸浮菌液注射接種于40d苗齡煙苗的莖基部，每株接種5mL菌液，1000孢子/mL，每個(gè)品種設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)接種15株；接種后將育苗盤放入28℃恒溫池，及時(shí)噴水保持較高濕度，誘發(fā)病害產(chǎn)生；

4)病情調(diào)查與分級(jí)

接種后3d調(diào)查發(fā)病情況，以后每隔2d～3d調(diào)查一次發(fā)病情況，記錄發(fā)病率及病情指數(shù)；以感病對(duì)照發(fā)病率，達(dá)到70％左右的病情指數(shù)作為品種抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，病害嚴(yán)重度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)按GB/T?23222-2008的規(guī)定；

5)抗性評(píng)價(jià)

抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)按GB/T?23224-2008的規(guī)定。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定方法，其特征在于：步驟2)所述的營(yíng)養(yǎng)液為市售的煙草漂浮育苗專用肥料配制。