[發明專利]一種簡化無核葡萄胚挽救的方法

無效

• 申請號: 201010278552.0
• 申請日: 2010-09-07
• 公開（公告）號: CN101982065A
• 公開（公告）日: 2011-03-02
• 發明（設計）人: 項殿芳;閆淑芳;王娜
• 申請（專利權）人: 河北科技師范學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 秦皇島市維信專利事務所 13102
• 代理人: 戴輝

1.一種簡化無核葡萄胚挽救的方法，其方法步驟是：

(1)綜合培養基的制備，首先選取原料硝酸鉀0.095％、硝酸銨0.072％、磷酸二氫鉀0.0068％、硫酸鎂0.0185％、氯化鈣0.0166％、硼酸0.0003％、硫酸錳0.00223％、硫酸鋅0.001％、鉬酸鈉0.000025％、硫酸銅0.000008％、煙酸0.00005％、鹽酸硫胺素0.00005％、鹽酸吡哆醇0.00005％、甘氨酸0.0002％、檸檬酸鐵0.001％、GA₃0.00001％-0.0003％、IAA?0.00001％-0.0003％混合成含有激素的混合母液，將混合母液中加入蔗糖0、003％-0、006％、瓊脂0.0003％-0、0006％混合成含有激素的母液，待母液溶解完畢定容形成綜合培養基，將綜合培養基pH值調制5.8～6.5，然后將分裝好的綜合培養基放入高壓滅菌鍋中滅菌，滅菌條件：壓強1.05MPa，溫度121，滅菌時間15～20min備用；

(2)選取盛花后72d的種子敗育型無核葡萄幼果，流水沖洗，在超凈工作臺前分別用升汞、酒精消毒，無菌條件下剝出胚珠；

(3)將無菌胚珠接種在綜合培養基上，暗培養，培養基pH?5.8～6.2，培養溫度25～30℃；

(4)胚珠培養40～60d時對其剝胚處理，繼續接種在綜合培養基上，并采用光照培養2000～4000LX，20～30d時胚開始萌發，下部逐漸發出胚根，上部逐漸長出兩片子葉，最后成苗。

2.根據權利要求1所述的簡化無核葡萄胚挽救的方法，其特征是，所述步驟(1)綜合培養基原料的濃度配比是：硝酸鉀0.095％、硝酸銨0.072％、磷酸二氫鉀0.0068％、硫酸鎂0.0185％、氯化鈣0.0166％、硼酸0.0003％、硫酸錳0.00223％、硫酸鋅0.001％、鉬酸鈉0.000025％、硫酸銅0.000008％、煙酸0.00005％、鹽酸硫胺素0.00005％、鹽酸吡哆醇0.00005％、甘氨酸0.0002％、VB₅0.000025％、檸檬酸鐵0.001％、GA₃0.00001％-0.0003％、IAA?0.00001％-0.0003％、蔗糖0、003％-0、006％、瓊脂0.0003％-0、0006％。

3.根據權利要求1所述的簡化無核葡萄胚挽救的方法，其特征是，綜合培養基原料的濃度配比是：硝酸鉀0.095％、硝酸銨0.072％、磷酸二氫鉀0.0068％、硫酸鎂0.0185％、氯化鈣0.0166％、硼酸0.0003％、硫酸錳0.00223％、硫酸鋅0.001％、鉬酸鈉0.000025％、硫酸銅0.000008％、煙酸0.00005％、鹽酸硫胺素0.00005％、鹽酸吡哆醇0.00005％、甘氨酸0.0002％、VB₅0.000025％、檸檬酸鐵0.001％、GA₃0.00001％-0.0003％、IBA?0.00001％-0.0003％、蔗糖0、003％-0、006％、瓊脂0.0003％-0、0006％。

4.根據權利要求1所述的簡化無核葡萄胚挽救的方法，其特征是，綜合培養基原料的濃度配比是：硝酸鉀0.095％、硝酸銨0.072％、磷酸二氫鉀0.0068％、硫酸鎂0.0185％、氯化鈣0.0166％、硼酸0.0003％、硫酸錳0.00223％、硫酸鋅0.001％、鉬酸鈉0.000025％、硫酸銅0.000008％、煙酸0.00005％、鹽酸硫胺素0.00005％、鹽酸吡哆醇0.00005％、甘氨酸0.0002％、VB₅0.000025％、檸檬酸鐵0.001％、GA₃0.00001％-0.0003％、6-BA0.00001％-0.0003％、蔗糖0、003％-0、006％、瓊脂0.0003％-0、0006％。

5.根據權利要求1所述的簡化無核葡萄胚挽救的方法，其特征是，綜合培養基原料的濃度配比是：硝酸鉀0.095％、硝酸銨0.072％、磷酸二氫鉀0.0068％、硫酸鎂0.0185％、氯化鈣0.0166％、硼酸0.0003％、硫酸錳0.00223％、硫酸鋅0.001％、鉬酸鈉0.000025％、硫酸銅0.000008％、煙酸0.00005％、鹽酸硫胺素0.00005％、鹽酸吡哆醇0.00005％、甘氨酸0.0002％、VB₅0.000025％、檸檬酸鐵0.001％、GA₃0.00001％-0.0003％、L-半胱氨酸0.0001％-0.0003％+水解酪蛋白0.01％-0.06％、蔗糖0、003％-0、006％、瓊脂0.0003％-0、0006％。