[發(fā)明專利]一種提取過氧化氫酶的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010277443.7
• 申請(qǐng)日: 2010-09-09
• 公開（公告）號(hào): CN102399759A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 丁國(guó)才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海海帝園藝有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/08
• 分類號(hào): C12N9/08
• 代理公司: 上海漢聲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236
• 代理人: 郭國(guó)中

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種提取生物酶的提取方法，具體涉及一種提取過氧化氫酶的方法。

背景技術(shù)

過氧化氫酶存在于紅細(xì)胞及某些組織內(nèi)的過氧化體中，它的主要作用就是催化H₂O₂分解為H₂O與O₂，使得H₂O₂不至于與O₂在鐵螯合物作用下反應(yīng)生成非常有害的-OH，幾乎所有的生物機(jī)體都存在過氧化氫酶。現(xiàn)在高中生物(必修)教材中基本都設(shè)置了“比較過氧化氫酶和Fe³⁺的催化效率”的實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)探索的是酶的特性之一即高效性。教材建議用動(dòng)物的肝臟來制備過氧化氫酶溶液，實(shí)驗(yàn)時(shí)，教師必須用新鮮的剛從動(dòng)物體內(nèi)取出的肝臟做為實(shí)驗(yàn)材料。如果肝臟不新鮮，效果就不好。但是在基層中學(xué)往往很難滿足這樣的要求，因此很多農(nóng)村中學(xué)沒有開設(shè)該實(shí)驗(yàn)。如果能夠克服本實(shí)驗(yàn)中的取材難問題，提供一種高效方便的過氧化氫酶的提取方法，將會(huì)對(duì)教學(xué)產(chǎn)生極大的方便。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了一種取材方便，提取出的過氧過氫活性高的一種提取過氧化氫酶的方法，其技術(shù)方案如下：

一種提取過氧化氫酶的方法，包含以下步驟：

a.將植物種子置于無土培養(yǎng)容器中，加入培養(yǎng)液放置，環(huán)境溫度保持在20～30℃，在該步驟中的植物種子，可以選自小麥、玉米、大豆等，優(yōu)選小麥。

b.將放置了2～15天后的處于萌發(fā)狀態(tài)的植物子研磨成均漿，放置的時(shí)間優(yōu)先7天。

c.將步驟b中的均漿加入去離子水中攪拌，然后靜置0.5～5小時(shí)，靜置時(shí)間優(yōu)選1～2個(gè)小時(shí)，取上層清液即得到高效的過氧化氫酶溶液。在該步驟后面還可以有一個(gè)后處理步驟，將含有勻漿的去子離水溶液進(jìn)行常壓過濾。這樣的好處時(shí)可以將該溶液中的雜質(zhì)去隊(duì)，使過氧化氫酶的溶液更清徹透亮。

過氧化氫酶存在于所有已知的動(dòng)物的各個(gè)組織中，特別在肝臟中以高濃度存在。但是這種提取材料一方面不方便，另一方面受到制備條件的限制，不能夠隨時(shí)隨地的制備。

使用本發(fā)明的提取過氧化氫酶的方法其優(yōu)點(diǎn)在于：

1.取材方便，因?yàn)閯?dòng)物的內(nèi)臟內(nèi)器官對(duì)于學(xué)生教育來說取材不易并且新鮮的內(nèi)臟對(duì)于一些學(xué)校來說成本也比較高昂。

2.提取的過程中處理方便，不會(huì)引起殘余物的粘附等情況造成實(shí)驗(yàn)器材的不易清洗。

3.該方法制備的過氧化氫酶溶液幾乎無色，透明度高，對(duì)于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象來說更加明顯、清楚。

具體實(shí)施例

下面將結(jié)合本發(fā)明的具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行解釋：

制備實(shí)施例：

制備步驟：實(shí)驗(yàn)前7天將小麥種子播種在鋪有濕紗布的玻璃皿里，放在溫暖的地方，紗布要經(jīng)常保持濕潤(rùn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，稱取40g萌發(fā)的小麥種子，放在研缽中，將其研磨成勻漿，然后轉(zhuǎn)移到500mL的燒杯中，加滿蒸餾水，攪拌均勻，靜置1～2h，然后將該含有勻漿的去離子水常壓過濾，得到澄清透亮的溶液，即為符合實(shí)驗(yàn)要求的過氧化氫酶溶液。

檢測(cè)實(shí)施例：

實(shí)驗(yàn)器材：編號(hào)分別為1、2、3的三只5mL試管，蒸餾水，F(xiàn)eCl₃溶液，過氧化氫溶液。

實(shí)驗(yàn)方法：將編號(hào)1、2、3的三只5mL試管內(nèi)分別加入2mL的過氧化氫溶液，然后同步在1號(hào)試管內(nèi)加入2滴制備實(shí)施例中制備的過氧化氫酶溶液，在2號(hào)試管中滴加2滴FeCl₃溶液，在3號(hào)試管內(nèi)滴加2滴蒸餾水，滴加完畢后觀察三只試管的反應(yīng)現(xiàn)象，同時(shí)進(jìn)行記錄，得到的數(shù)據(jù)制表如下：

表1：過氧化氫酶和Fe³⁺的催化效率比較

注：在該表中。“-”表示沒有添加。所得到的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象均為目測(cè)得到的結(jié)果。

由該表可以得出：使用具體實(shí)施例1中的制備方法制備得到的過氧化氫酶溶液活性好，效率高，能夠得了明顯清楚的實(shí)驗(yàn)效果，并且從具體實(shí)施例二中得出得到的數(shù)據(jù)來看，過氧化氫酶的本身的性質(zhì)也得到了確認(rèn)和檢測(cè)。