[發明專利]一種猴偏側帕金森病模型及其藥物篩選方法

無效

• 申請號: 201010273855.3
• 申請日: 2010-09-06
• 公開（公告）號: CN102380106A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 李鵬;王偉;李宏霞;王莉;劉文科;徐策
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院;成都華西海圻醫藥科技有限公司;國家成都中藥安全性評價中心
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A01K67/027
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 李高峽

技術領域

本發明涉及一種猴偏側帕金森病模型及其藥物篩選方法。

背景技術

帕金森病(Parkinson’s?disease，PD)的實驗動物模型已有多種，包括小鼠、大鼠的外科損傷或6-羥多巴立體定向注射毀損的模型等。最有價值的模型動物應是和人類神經系統尤其是中腦基底節區有著相似結構、功能和復雜程度的物種。靈長類PD動物模型能夠反映PD癥狀的基本特征，是目前最接近人類PD的動物模型，為PD的基礎研究提供了良好的基礎和平臺。劉晟，等，MPTP誘導猴偏側帕金森病模型的制作，《中國醫學影像技術》，2006年22卷3期，報道的方法是經一側頸內動脈注入1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶(MPTP)，其劑量為1.0-2.0mg/kg，對實驗組猴的行為表現及影像學表現：包括MRI、PET及SPECT進行檢測及酪氨酸羥化酶(TH)免疫組化染色；結果注射MPTP后第5～7天逐漸出現偏側帕金森病癥狀，肌注阿樸嗎啡后動物向左側快速旋轉；PET檢查示實驗組猴右側(患側)18F-脫氧葡萄糖平均標準攝取值較左側明顯減低，SPECT檢查示多巴胺轉運蛋白(DAT)顯像右側紋狀體放射性攝取明顯減低，二者均與對側及給藥前對比統計學上差異有顯著性差異(P＜0.05)。TH免疫組化染色示右側黑質多巴胺能神經元明顯減少。結論經一側頸內動脈注射MPTP制作偏側帕金森病猴模型安全、簡單、成模率高，是研究帕金森病的一種理想的帕金森病動物模型。陳生弟，等，多巴誘發由MPTP制備的偏側帕金森病猴產生運動障礙，《中華神經精神科雜志》，1992年25卷1期，該文獻報道了MPTP制備的偏側帕金森病模型，實驗選用雌性恒河猴，麻醉后，鈍性分離暴露右側頸總動脈，將新鮮配制的鹽酸MPTP(0.5-0.7mg/kg，容量0.7-1.2ml)溶液緩慢注入頸總動脈內。該文獻中注射容量小，MPTP的濃度高，建模操作不安全，易造成造模失敗，文獻中共用5只猴進行造模，其中有2只猴因未產生PD癥狀和旋轉行為在2周后又重復注射了MPTP1次，造模成功率低。

發明內容

本發明的技術方案是提供了一種猴偏側帕金森病模型及其藥物篩選方法。

本發明提供了一種猴偏側帕金森病模型的制備方法，將劑量為0.45-0.9mg/kg，施用體積20ml的MPTP，以3ml/min勻速施用于猴。

進一步優選地，所述的劑量為：0.6mg/kg。

所述的MPTP施用方法是動脈注射。

進一步地，所述的MPTP施用方法是夾閉頸外動脈后，采用微量泵經頸總動脈逆血流方向勻速注射。

采用微量泵勻速注射低濃度藥物可以使用更少的藥物對該側中腦組織進行損傷；同時由于作用時間長，藥物局部吸收更為徹底，一方面節約了藥物，另一方面也有助于減少對實驗猴的全身影響，實驗操作更安全。

本發明還提供了該方法制備的動物模型在篩選治療偏側帕金森病的藥物中的用途。

本發明還提供了一種篩選治療偏側帕金森病的藥物的方法，它包括如下步驟：

a、將劑量為0.45-0.9mg/kg的MPTP施用于獼猴，建立猴偏側帕金森病模型；

b、將候選藥物施用于動物模型；

c、觀察候選藥物對偏側帕金森病的量化指標的影響情況，并進行評分，評價潛在治療偏側帕金森病的藥物。

其中，步驟a中所述的所述的MPTP的劑量為：0.45-0.9mg/kg，施用體積20ml，施用速度為3ml/min勻速施用。

進一步優選地，步驟a中所述的劑量為：0.6mg/kg。

本發明造模方法與文獻“陳生弟，等，多巴誘發由MPTP制備的偏側帕金森病猴產生運動障礙，《中華神經精神科雜志》，1992年25卷1期”報道的方法相比，注射劑量不同：本發明方法的注射劑量為0.45-0.9mg/kg，獲得不同癥狀嚴重程度模型猴；注射容積不同：本發明方法將MPTP溶液稀釋至20ml，經微量泵勻速注入；注射方式不同：本方法為夾閉頸外動脈后，經頸總動脈逆血流方向注射。