[發明專利]一種高純度兩性霉素B的制備方法

有效

• 申請號: 201010273453.3
• 申請日: 2010-09-06
• 公開（公告）號: CN102382158A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 張雪霞;李寧;蔣沁;王健;李曉露;任風芝;林毅;王海燕;路新華;高月麒
• 申請（專利權）人: 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種高純度兩性霉素B的制備方法，包括下述步驟：

1)在兩性霉素B發酵液中加入酸性物質和助濾劑，攪拌；

2)固液分離，得兩性霉素B菌絲體；

3)加入醇和堿水，攪拌；

4)固液分離，得兩性霉素B提取液；

5)膜超濾，得凈化液；

6)調節pH值≤7.0，析出兩性霉素B結晶；

7)固液分離，得兩性霉素B結晶粉。

2.根據權利要求1的方法，包括下述步驟：

1)在常溫條件下，在兩性霉素B發酵液中加入酸性物質，調節pH值至2.0-4.0，加入助濾劑，攪拌30分鐘-2小時；

2)固液分離，得到兩性霉素B菌絲體；

3)5-30℃條件下，在兩性霉素B菌絲體中加入質量百分比為40-80％的醇和pH值為9.0-12.0的堿水，攪拌1-3小時；

4)固液分離，得到兩性霉素B提取液；

5)將兩性霉素B提取液通過截留分子量為5000-30000Da的膜超濾，除去熱源、雜蛋白和色素等大分子量雜質后得到凈化液；

6)常溫下，用酸調節凈化液pH值至4.5-7.0，析出兩性霉素B結晶；

7)固液分離兩性霉素B結晶，得到兩性霉素B結晶粉。

3.根據權利要求2的方法，其中步驟1)所述酸性物質為有機酸或無機酸。

4.根據權利要求3的方法，其中有機酸為草酸或乙酸，無機酸為鹽酸。

5.根據權利要求2的方法，其中步驟1)所述助濾劑為珍珠巖或硅藻土，用量為2-10％(W/V)。

6.根據權利要求2的方法，其中步驟3)所述醇為甲醇或乙醇，所述堿水的量為菌絲重的2-6倍(V/W)，所述堿為氫氧化鉀、氫氧化鈉或有機堿。

7.根據權利要求2的方法，其中步驟3)所述醇和堿水加入時的溫度為5-30℃。

8.根據權利要求2的方法，其中步驟5)所述膜為陶瓷膜、不銹鋼膜、中空纖維膜或其他材質的膜組件。

9.根據權利要求2的方法，其中步驟6)所述酸為鹽酸、磷酸或有機酸。

10.根據權利要求2的方法，其中步驟7)所述的經固液分離得到兩性霉素B結晶粉后，用真空干燥的方式在40-60℃條件下干燥至水分介于2.0-5.0％，得到高純度兩性霉素B。