[發明專利]中藥神曲在殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體中的應用

有效

• 申請號: 201010273320.6
• 申請日: 2010-09-03
• 公開（公告）號: CN101933949A
• 公開（公告）日: 2011-01-05
• 發明（設計）人: 沈彥萍;陳宇光;沈文婧
• 申請（專利權）人: 上海沈李科工貿有限公司
• 主分類號: A61K36/00
• 分類號: A61K36/00;A61K38/47;A61K47/36;A61K9/127;A61P1/14;A61P37/02;A61P31/04
• 代理公司: 上海宏威知識產權代理有限公司 31250
• 代理人: 金利琴

技術領域

本發明涉及中藥神曲作為腸道吸收促進劑的新用途，特別是神曲在殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體的腸道吸收促進劑的應用。

背景技術

溶菌酶(Lysozyme)，化學名稱為N-乙酰胞壁質聚糖水解酶，又稱胞壁質酶，能切斷N-乙酰氨基葡萄糖和N-乙酰胞壁酸之間的β-1，4糖苷鍵，破壞肽聚糖支架，在內部滲透壓的作用下使細胞脹裂開，具有溶解革蘭氏陽性菌細胞壁的能力，是一種堿性的粘多糖水解酶。而且溶菌酶作為一種重要的非特異性免疫因子，在體內具有抗菌消炎、免疫調節及加快組織修復等多種功能(Tenovuo?J.，Clinical?applications?of?antimicrobial?host?proteins?lactoperoxidase?lysozyme?and?lactoferrin?in?xerostomia：efficacy?and?safety，Oral?Dis.，2002，8(1)：23-29.)。

溶菌酶作為藥物以含片、粉劑和腸溶膠囊為主，多作用于胃腸道等組織，或作為體外用藥，其體內吸收效率低下，生物利用度也很有限。為提高溶菌酶的血藥濃度，改變口服藥物的劑型可能克服影響溶菌酶口服吸收的各種因素。

研究人員對蛋白類藥物的口服吸收給予廣泛關注，其中最普遍、有效的方法就是將藥物微囊化處理。脂質體是一項比較成熟的藥物載體技術，能避免內容物被氧化、降解，或被人體的酸或酶破壞，而且與細胞有一定的親和性，可增加藥物透過細胞膜的能力。作為藥物載體，脂質體在體內具有一定的靶向性和藥物緩釋作用，能更有效并長時間的發揮藥效。而且脂質體膜材與哺乳動物細胞相似，由磷脂等組成，不會引起局部組織損傷，不誘發過敏反應而能多次長期使用，對人體無毒、安全。

有研究發現生物黏附性的給藥系統能延長藥物在吸收部位的停留時間，有助于藥物的吸收(Thanou?M.，Verhoef?J.C.，Junginger?H.E.，Oral?drug?absorption?enhancement?by?chitosan?and?its?derivatives，Adv.Drug?Deliv.Rev.，2001，52：117-126.)，殼聚糖是具有良好的生物相容性和較強的生物粘附性的多糖，作為藥物載體的材料有助于藥物的吸收，其原因可能是膜上生物黏附和緊密連接的瞬間展開。因此以殼聚糖包覆脂質體可進一步促進溶菌酶的吸收。

為了更進一步促進溶菌酶的吸收，希望找到毒性小、安全性好的腸道吸收促進劑，中藥作為我國中醫的特有藥物，可以從豐富的中藥材中篩選獲得與現有的腸道吸收促進劑功能相同的藥物，促進溶菌酶的吸收。

發明內容

本發明的目的是提供一種中藥神曲作為殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體的腸道吸收促進劑的應用。

本發明的發明目的是通過如下技術方案實現的。

將中藥神曲按常規方法煎制得中藥干重0.6g/ml的湯劑；采用薄膜法制備殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體，制得的殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體的載藥量為5.46mg/ml，使用時，中藥神曲與殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體的體積比為：15∶1-5∶3。

所述殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體按文獻參考采用薄膜法制備，將磷脂混合物和維生素E溶于適量無水乙醚，水浴超聲溶解。將溶液在旋轉蒸發儀上減壓蒸除有機試劑，直至干燥脂質膜沉淀在瓶壁上，繼續抽吸10min后停止。加入溶菌酶溶液繼續旋轉3小時，探針式超聲1min，形成溶菌酶脂質體溶液。在磁力攪拌的作用下，緩慢滴加殼聚糖溶液，10℃孵育1小時以上。選擇卵磷脂∶膽固醇為4∶1(W/W)，溶菌酶∶磷脂混合物為1∶6.25(W/W)作為最佳制備工藝條件，制得的微球具有良好的分散性和穩定性，其平均粒徑為(61.57±13.2)nm，包封率為81.9％，載藥量為5.46mg/ml，溶菌酶酶活為原來的87.9％。

中藥材——神曲(Medicated?Leaven)，歸屬脾、胃經，在中醫中起健脾和胃、消食化積的功效。

本發明以殼聚糖包覆的脂質體作為蛋白類藥物溶菌酶的載體，通過實驗證明了神曲能明顯促進口服溶菌酶的腸道吸收，提高其生物利用度，并且長期服用該藥物后使溶菌酶在體內的停留時間延長至一周以上。

本發明結果表明，小鼠僅口服溶菌酶溶液后其腸道吸收不足1％，而小鼠連續口服神曲與溶菌酶脂質體4天后其溶菌酶的腸道吸收高達9％，再次延長口服神曲與溶菌酶脂質體的時間至14天后小鼠對溶菌酶的腸道吸收超過13％，而且停止給藥后9天內仍能在血液中檢測出溶菌酶。可見神曲能大幅度促進殼聚糖包覆的溶菌酶脂質體的腸道吸收。