[發(fā)明專(zhuān)利]一種利用玉米皮渣為原料發(fā)酵生產(chǎn)微生物油脂的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010272455.0
• 申請(qǐng)日: 2010-09-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101948883A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-01-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 薛冬樺;安龍潘
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P7/64
• 分類(lèi)號(hào): C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 長(zhǎng)春科宇專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 22001
• 代理人: 馬守忠

1.一種利用玉米皮渣為原料發(fā)酵生產(chǎn)微生物油脂的方法，其特征在于，步驟和條件如下：

(1)玉米皮渣兩步水解

①玉米皮渣酶水解

在反應(yīng)釜中加入碎粉至40-200目玉米干皮渣，按照干燥的玉米皮渣的質(zhì)量g與水的體積mL的配比為1∶4-8加入水，加入玉米皮渣干重0.5-2％的α-淀粉酶，淀粉酶的活性為36000IU/mL，再加入玉米皮渣干重0.1-0.2％的CaCl₂，于40-50℃恒溫20-50min，升溫至80-85℃恒溫60-120min，再煮沸10min，降溫至50-60℃加入玉米皮渣干重0.1-0.5％的糖化酶，糖化酶的活性為100000IU/mL，于60℃保溫30min，采用過(guò)濾或離心的方法得到玉米皮渣酶解液的上清液；

②玉米皮渣酸水解

在反應(yīng)釜中加入步驟①玉米皮渣水解后的濾渣，按該濾渣酶解前玉米皮渣干重g與水的體積mL的配比為1∶4-8加入水，再加入該溶液總體積比的0.2-0.6％鹽酸水解2-4h，水解溫度80-100℃，水解后采用過(guò)濾或離心的方法得到玉米皮渣酸解液的上清液；所述鹽酸質(zhì)量濃度為37％；

(2)玉米皮渣水解液的中和

將步驟(1)的①和②得到的上清液混合，再將其濃縮至所含的還原糖質(zhì)量濃度為60-80g/L，加入混合上清液體積的1.5-2.0％玉米漿，用Ca(OH)₂調(diào)pH值為6.0-7.0，70℃恒溫20-30min，離心除去沉淀，得到玉米皮渣水解液；

(3)油脂微生物發(fā)酵培養(yǎng)

①種子培養(yǎng)：在無(wú)菌條件下將已長(zhǎng)滿(mǎn)深黃被孢霉(Mortierellaisabellina)分生孢子的試管斜面加入2-3ml無(wú)菌水，輕輕振蕩使之懸浮于無(wú)菌水中，吸取孢子懸浮液加入已滅菌的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中，搖瓶培養(yǎng)溫度28-30℃，搖瓶轉(zhuǎn)速80-100r/min，培養(yǎng)時(shí)間20-24h，得到發(fā)酵種子液；

所述的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的組成為：質(zhì)量/體積濃度為20％的土豆汁1000ml，葡萄糖20g，KH₂PO₄3g，MgSO₄·7H₂O?1.5g，pH?6.0；

所述的所述的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基在121℃條件下滅菌15min；

②發(fā)酵培養(yǎng)：在步驟(2)得到的玉米皮渣水解液中，添加玉米皮渣水解液體積的0.1-0.2％硫酸銨，在玉米皮渣發(fā)酵培養(yǎng)液中接入步驟(3)的①得到種子液，接入的種子液是添加硫酸銨后的玉米皮渣水解液體積的5-10％，在全自動(dòng)發(fā)酵裝置中進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)酵溫度28-30℃，通氣量0.4-0.8vvm，攪拌轉(zhuǎn)速120-200r/min，發(fā)酵周期4-6d，過(guò)濾或離心獲得油脂微生物菌體；所述的玉米皮渣發(fā)酵培養(yǎng)液在121℃條件下滅菌15min；

(4)微生物油脂制備

將步驟(3)的②得到的油脂微生物菌體干燥，再用有機(jī)溶劑提取法，對(duì)干燥的油脂微生物菌體細(xì)胞內(nèi)油脂進(jìn)行提取：把干燥的油脂微生物菌體研磨后用濾紙包裝，放入索氏提取器中，按照干燥的油脂微生物菌體的質(zhì)量g與石油醚的體積mL的配比為1∶15加入石油醚，提取溫度90-100℃，提取時(shí)間5-8h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓去除有機(jī)溶劑，得到微生物油脂。