[發明專利]一種高效純化金屬離子結合蛋白的離子交換層析分離純化方法無效
| 申請號： | 201010271461.4 | 申請日： | 2010-09-03 |
| 公開（公告）號： | CN102382168A | 公開（公告）日： | 2012-03-21 |
| 發明（設計）人： | 蘇志國;張焱;羅堅;馬光輝 | 申請（專利權）人： | 中國科學院過程工程研究所 |
| 主分類號： | C07K1/36 | 分類號： | C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16 |
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| 地址： | 100190 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高效 純化 金屬 離子 結合 蛋白 離子交換 層析 分離 方法 | ||
【權利要求書】：
1.高效純化金屬離子結合蛋白的離子交換層析分離純化方法，其步驟包括：
1)選取含有金屬離子結合蛋白的待分離原料，沉淀離心去除脂類等雜質后收集上清液獲得蛋白混合物；
2)在所得蛋白混合物中添加適量的蛋白結合金屬離子；
3)選擇不與蛋白結合金屬離子沉淀的緩沖液作為離子交換層析緩沖液；
4)在離子交換層析緩沖液中添加適量的蛋白結合金屬離子；
5)將蛋白混合物經過離子交換層析和凝膠過濾層析聯用的組合層析，分離得到金屬離子結合蛋白。
2.如權利要求1所述的方法，其中的待分離原料為轉基因動物乳液、轉基因工程菌的發酵液、轉基因動物細胞的發酵液。
3.如權利要求1所述的方法，其中所述的蛋白質是有金屬離子結合能力的蛋白，如重組人源α-乳清白蛋白，牛源α-乳清白蛋白，重組人乳轉鐵蛋白等。
4.如權利要求1所述的方法，蛋白結合金屬離子為鈣離子、三價鐵離子等。
5.如權利要求1所述的方法，離子交換層析所用的緩沖液為Tris-HCl緩沖液。
6.如權利要求1所述的方法，離子交換層析介質為常用的蛋白質層析介質，如瓊脂糖基質的DEAE、Q、SP離子交換層析介質等。
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