[發明專利]用于表達異二聚體糖蛋白激素的表達框、表達載體及制備方法

有效

• 申請號: 201010266735.0
• 申請日: 2010-08-30
• 公開（公告）號: CN102002495A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發明（設計）人: 何太平;葛永紅;譚曉晶;聶艷桃;楊波;糖箐燕;宋春雷;雷韜
• 申請（專利權）人: 成都蓉生藥業有限責任公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/10
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所 51124
• 代理人: 武森濤

1.用于表達異二聚體糖蛋白激素的表達框，其特征在于其結構為在啟動子后可操作的連接有雙亞基糖蛋白激素的α亞基和β亞基的編碼序列，各個亞基的編碼序列之間用內部核糖體進入位點序列IRES進行連接。

2.根據權利要求1所述的用于表達異二聚體糖蛋白激素的表達框，其特征在于：所述的α亞基的核苷酸序列為SEQ?ID?No.1所示或為其簡并序列。

3.根據權利要求2所述的用于表達異二聚體糖蛋白激素的表達框，其特征在于：所述的β亞基的核苷酸序列為SEQ?ID?No.2、SEQ?ID?No.3、SEQ?ID?No.4或SEQ?ID?No.5中的任一項所示或為其簡并序列。

4.根據權利要求1所述的用于表達異二聚體糖蛋白激素的表達框，其特征在于：所述的啟動子為巨細胞病毒啟動子。

5.根據權利要求1所述的用于表達異二聚體糖蛋白激素的表達框，其特征在于：所述的內部核糖體進入位點序列為SEQ?ID?No.6所示。

6.一種用于表達異二聚體糖蛋白激素的的表達載體，其特征在于：所述載體上具有權利要求1～6任一項所述的表達框。

7.根據權利要求6所述表達載體，其特征在于：所述載體為pcDNA5。

8.根據權利要求7所述表達載體，其特征在于：該載體的核苷酸序列為SEQ?ID?No.7所示。

9.含有權利要求6或7或8所述的表達載體的宿主細胞。

10.制備權利要求1～5任一項所述的表達異二聚體糖蛋白激素的表達框的方法，其特征在于包括以下步驟：從基因庫中獲得人β亞基和α亞基的序列以及IRES基因序列，在基因水平上按β亞基-IRES-α亞基或α亞基-IRES-β亞基模式對人糖蛋白激素的β亞基和α亞基的序列以及IRES基因序列進行拼接，并在5端和3端設計與目標載體結合的內切酶位點，進行PCR方法并接得到或全基因合成得到。