[發明專利]產前診斷和監測的標記

有效

• 申請號: 201010266359.5
• 申請日: 2006-03-17
• 公開（公告）號: CN102010902A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 盧煜明;趙慧君;詹兆沖;徐寶賢
• 申請（專利權）人: 香港中文大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N27/62
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

相關申請的相互參考

本申請要求在2005年3月18日提交的美國臨時申請第60/663,293號的優先權，將其內容全部引用作為參考。

發明背景

通過例如絨毛膜絨毛取樣(CVS)或羊膜穿刺術的方法，可以使用從胎兒分離到的細胞進行常規產前診斷。然而，盡管操作極其小心，但是這些常規的方法依然是侵入性的，并且對母親和胎兒具有明顯的危險(Tabor?et?al.，Lancet?1：1287-1293，1986)。

現已開發出對這些侵入性方法的替代方法，例如，依據在母體循環中可以找到幾種胎兒細胞這一發現，可以對胎兒異常進行測定(Johansen?et?al.，Prenat.Diagn.15：921-931，1995)，更重要的是可以在母體血漿和血清中對非細胞的循環胎兒DNA進行測定(Lo?et?al.，Lancet350：485-487，1997)。現已證明，與分離和富集母體循環中胎兒細胞的必須步驟相比，無需對血漿或血清進行復雜的處理，母體血液中胎兒DNA的量就已足夠進行遺傳分析。使用基于聚合酶鏈反應(PCR)的技術，已經在母體血液中通過胎兒DNA測定實現了胎兒恒河猴D(RhD)基因型測定(Lo?et?al.，N.Engl.J.Med.339：1734-1738，1998)，胎兒性別測定(Lo?et?al.，Hum.Genet.90：483-488，1993)以及若干胎兒病癥的診斷(Amicucci?et?al.，Clin.Chem.46：301-302，2000；Saito?et?al.，Lancet?356：1170，2000；及Chiu?et?al.，Lancet?360：998-1000，2002)。

此外，已經有報道說明在先兆子癇(Lo?et?al.，Clin.Chem.45：184-188，1999and?Zhong?et?al.，Am.J.Obstet.Gynecol.184：414-419，2001)，胎兒21號染色體三體(Lo?et?al.，Clin.Chem.45：1747-1751，1999?and?Zhong?et?al.Prenat.Diagn.20：795-798，2000)以及妊娠劇吐(Sekizawa?et?al.，Clin?Chem.47：2164-2165，2001)中母體血漿/血清中胎兒DNA的數量異常。美國專利第6,258,540號中也已經公開了用于產前遺傳分析的母體血液中胎兒核酸測定的內容。

當對胎兒DNA進行分析時，研究人員通常將僅存在于男性胎兒中的Y染色體標記用作胎兒特異性標記。該方法將其技術的應用局限于50％的孕婦，即懷有男性胎兒的。而且，其它遺傳多態現象的使用也增加了基于胎兒DNA分析的復雜性。在母體血漿中發現的胎兒RNA為克服這些限制提供了可能的新方法(Poon?et?al.，Clin.Chem.46：1832-1834，2000)。

近來，美國專利申請第09/876,005號公開了基于在母體血液中對胎兒/胎盤RNA進行測定的非侵入性技術。此外，美國專利申請第10/759,783號還公開了某些胎盤表達的mRNA標記(例如人絨毛膜促性腺激素β亞基和人促腎上腺皮質素釋放激素)，這些標記可用來對諸如先兆子癇、胎兒染色體非整倍性以及未足月生產的妊娠和妊娠相關病癥進行測定。已經在母體血液中對多種胎盤來源的其它RNA類型進行了測定，參見，例如Oudejans?et?al.，Clin?Chem.2003，49(9)：1445-1449，以及Go?et?al.，Clin.Chem.2004，50(8)：1413-1414。本發明還公開了其它的衍生自胎兒/胎盤的RNA類型，如表1至表6所示，這些RNA類型是在母體血液中發現的，并且可用作檢測妊娠、或胎兒基因型分析、或對先兆子癇和諸如18號染色體三體和21號染色體三體的胎兒染色體非整倍性進行診斷、監測和預測的標記。因此，本發明還提供了非侵入性產前診斷的其它工具以及妊娠檢測的替代方法。

發明概述