[發明專利]UDP-葡萄糖基轉移酶突變體的編碼基因及其應用

有效

• 申請號: 201010261966.2
• 申請日: 2010-08-24
• 公開（公告）號: CN101942424A
• 公開（公告）日: 2011-01-12
• 發明（設計）人: 王有年;馬蘭青;師光祿;葉和春
• 申請（專利權）人: 北京農學院
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N7/01;C12N15/11;C12P19/44
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.一種蛋白質，是如下1)或2)的蛋白質：

1)由序列表中的序列4的氨基酸殘基序列組成的蛋白質；

2)將序列表中的序列4氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有UDP-葡萄糖基轉移酶功能和/或與紅景天甙合成相關的由1)衍生的蛋白質。

2.權利要求1所述蛋白質的編碼基因。

3.根據權利要求2所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因為如下1)-5)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列3所示的DNA分子；

2)序列表中序列3自5’末端第1位到第1443位核苷酸所示的DNA分子；

3)序列表中序列3自5’末端第4位到第1443位核苷酸所示的DNA分子；

4)在嚴格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且編碼具有UDP-葡萄糖基轉移酶功能和/或與紅景天甙合成相關的蛋白所示的DNA分子；

5)與1)或2)或3)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且編碼具有UDP-葡萄糖基轉移酶功能和/或與紅景天甙合成相關的蛋白所示的DNA分子。

4.含有權利要求2或3所述編碼基因的重組載體、重組菌、轉基因細胞系、表達盒或重組病毒。

5.根據權利要求4所述的重組載體，其特征在于：所述重組載體為將權利要求2或3所述編碼基因插入載體pET-30b(+)的多克隆位點間得到的重組載體。

6.擴增權利要求2或3所述編碼基因全長或任一片段的引物對；所述引物對如下所示：一條引物序列如序列表中序列5所示，另一條引物序列如序列表中序列6所示。

7.權利要求1所述蛋白質在合成紅景天甙中的應用，或權利要求2或3所述編碼基因在合成紅景天甙中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于：所述合成紅景天甙為體外合成紅景天甙。

9.一種制備苯亞甲基丙酮的方法，其特征在于：為以酪醇和UDP-葡萄糖為底物，在權利要求1所述蛋白質的催化作用下，得到紅景天甙。