[發明專利]促進皮膚傷口無疤痕愈合的siRNA及應用

無效

• 申請號: 201010260249.8
• 申請日: 2010-08-24
• 公開（公告）號: CN102031260A
• 公開（公告）日: 2011-04-27
• 發明（設計）人: 徐軍;沈艷華;唐盛高;陸陽
• 申請（專利權）人: 蘇州圣諾生物醫藥技術有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61P17/02
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 孫仿衛

技術領域

本發明涉及促進皮膚傷口無疤痕愈合的siRNA分子、靶向多個傷口無疤痕愈合相關基因的多個siRNA分子的雞尾酒組合、以siRNA分子或者其雞尾酒組合作為有效成分的藥物組合物。

背景技術

皮膚是機體最大的器官，由下層的內皮層(真皮)和外部的上皮層(表皮)組成，皮膚的基本功能是機體對外界環境的保護屏障。當機體皮膚的完整性由于受傷或疾病而大面積缺損后，可因其主要屏障功能的喪失而導致機體死亡。在美國，每年有超過125萬燒傷患者和650萬因擠壓、靜脈淤滯或糖尿病引起的慢性皮膚潰瘍患者。傷口治療的首要目標是快速的愈合并恢復功能，同時盡量減少疤痕面積、恢復美觀。近期細胞和分子生物學發展迅猛，極大增強了我們對傷口修復和組織再生的生物學過程的理解，也提升了傷口護理的水平。

傷口修復：皮膚損傷的快速反應

受傷后組織恢復完整性的過程，是一項系統發育過程中形成的基本而重要的功能，也是宿主的天然免疫反應過程。高等脊椎動物的組織重構能力不如低等脊椎動物，后者組織損壞后還能重構，而前者快速修復后會形成纖維化的疤痕。無論是創傷、微生物感染或外來物質造成的損傷，均會發生一系列事件，包括凝結、炎癥、上皮再生、形成肉芽組織、基質和組織重塑等，這些事件在時間先后上有部分重疊。修復過程主要是由細胞因子等信號分子相互作用來介導的，這種相互作用以多級放大的模式來激活和調節細胞活性。一般通過人工構建模擬皮膚損傷過程的皮膚傷口模型來研究受傷后的反應。凝結反應發生在損傷初期，隨后是局部的急性炎癥反應，接著間葉細胞富集、增殖，基質合成。炎癥處理不當將導致慢性不愈的傷口、不可控制的基質累積(經常通過各種細胞因子通路)，從而導致額外的疤痕和纖維化等后遺癥。細胞因子的功能鑒別方面的不斷進步，為探索通過抑制/增強細胞因子來控制或調節病理修復過程提供了可能性。

胚胎傷口的無疤痕快速愈合

傷口愈合是一個動態的相互作用過程，涉及可溶性介質、血細胞、細胞間質和實質細胞。傷口愈合過程包括在時間先后上有重疊的三個階段——炎癥、組織形成和組織重塑。在胚胎皮膚形成階段，單細胞繁殖形成基底層后產生的角質細胞，經生長停滯期后，在分化程序的嚴格控制下由下向上遷移成為形態學完全不同的表皮層。使用類似的程序，表皮在有機體的整個生命過程中不斷更新。表皮形成后，成年哺乳動物皮膚也有快速修復損傷的能力。然而，如果追求快速傷口愈合和防止感染，則會導致傷口愈合不完美，常伴有表皮層和真皮層的疤痕出現。

相對于成年人的皮膚傷口修復，妊娠早期胎兒的傷口是通過再生過程修復的，其真皮和表皮能夠進行完美的無疤痕重建。與成年人相比，胎兒傷口在修復上有下述幾點顯著差異：胎兒傷口修復得比較快，并且很少或者不出現炎癥反應，其細胞因子/生長因子表達譜不同，表達量通常是較低的。

TGF-β抗體可部分地減少疤痕形成量

有大量證據表明傷口修復受細胞因子、生長因子及其它們的受體等一系列因子的調節(5-7)。這些調節因子通過一種復雜但有序的模式影響細胞的遷移、生長和增生，同時與嗜中性白細胞及巨噬細胞的浸潤、血管生成、纖維素增生、基質沉積、傷疤形成和表皮再植等有關。在傷口修復過程中，除了血小板與巨噬細胞，成纖維細胞是細胞因子或生長因子的主要來源。早期妊娠胎兒皮膚傷口的無疤痕修復主要是特定的細胞因子或生長因子作用的結果。

在眾多因子中，轉化生長因子β(TGF-β)在皮膚傷口愈合過程中的作用已經得到廣泛研究，對疤痕的形成起著重要的作用。TGF-β的主要功能是調控細胞增殖和分化，刺激細胞外基質如膠原的合成。在正常無疤痕胎兒的傷口中外源添加TGF-β可導致疤痕形成，同時還觀察到類似于成年人的炎癥反應。在成年鼠皮膚傷口使用TGF-β抗體中和能導致傷口部位疤痕數量的部分地減少，表明TGF-β具有促纖維化的特性。TGF-β刺激產生的Ⅰ型膠原是成年機體皮膚主要的膠原類型。但另一方面，TGF-β中和抗體并不能完全阻止成人皮膚疤痕形成，因而近期有一些研究對最為主要的疤痕形成因子的TGF-β的功能提出了質疑(8-15)。