[發(fā)明專利]一種液體生物拋光酶及其制造方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010259497.0
• 申請日: 2010-08-20
• 公開（公告）號: CN101974491A
• 公開（公告）日: 2011-02-16
• 發(fā)明（設計）人: 彭彥
• 申請（專利權）人: 彭彥
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C12N9/42;C12R1/885;C12R1/685
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 曹玉平

1.一種液體生物拋光酶，其特征在于，包含以下成分及活性：β-1，4-外切葡聚糖酶30000～40000u/mL、β-1，4-內切葡聚糖水解酶20000～30000u/mL、β-葡萄糖苷酶4000～5000萬u/mL和去離子水，pH值為4.7～5.2，上述各酶的總活力為1000～2000u/mL。

2.根據(jù)權利要求1所述的液體生物拋光酶，其特征在于：所述的β-1，4-外切葡聚糖酶通過微晶纖維素AVI法測試；所述的β-1，4-內切葡聚糖水解酶通過糖化力CMC法測試；所述的β-葡萄糖苷酶通過β-葡聚糖法測試，總活力通過FPA法測試。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的液體生物拋光酶，其特征在于：所述的液體生物拋光酶中還添加有如下成份，按重量百分比包含有：氯化納NaCl?5～30％、非離子表面活性劑0.5～5％、山梨醇4～15％、山梨酸鉀0.1～0.2％。

4.一種制造權利要求1所述的液體生物拋光酶的方法，其特征在于：包括如下步驟：

1)、原料處理：稻草粉、小麥秸稈粉等天然纖維素原料經過物理化學方法預處理的纖維素原料或纖維素粉的一種或一種以上，共1-5份，加入100份mandels營養(yǎng)液，調節(jié)pH為4.5～5.0，裝入發(fā)酵罐中，在108～162℃高壓蒸汽滅菌18～50分鐘；

2)、菌種制備：將里氏木霉Tricode?rmareesei、黑曲霉A.niger為生產菌株，分別經斜面試管培養(yǎng)、搖瓶擴大培養(yǎng)或發(fā)酵罐自擴大培養(yǎng)制備所需二級液體菌種；

3)、發(fā)酵生產：先將里氏木霉的二級液體菌種，按液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基體積的1～10％接種量接種于液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，20～40℃下通氣培養(yǎng)2～3天，再接入1～10％體積的黑曲霉二級液體菌種，20～40℃下繼續(xù)通氣培養(yǎng)2～4天，降培養(yǎng)液過濾，形成由β-1，4-外切葡聚糖酶、β-1，4-內切葡聚糖水解酶和β-葡萄糖苷酶混合的液體生物拋光酶。

5.根據(jù)權利要求4所述的方法，其特征在于：將液體生物拋光酶超濾濃縮至原來體積的1/10～1/3即為高活性的液態(tài)纖維素酶制劑，濃縮液經噴霧干燥可制成粉狀高活性濃縮纖維素酶制劑。